[發(fā)明專利]從去分化的、非誘發(fā)的刺阿甘樹細(xì)胞的體外培養(yǎng)物產(chǎn)生的制劑、其用于治療皮膚老化、炎癥和疤痕的用途及其生產(chǎn)

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201180017061.3
• 申請日: 2011-03-30
• 公開（公告）號: CN102821750B
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: N·斯圖爾德;A·曼代亞;N·卡斯泰-里齊
• 申請（專利權(quán)）人: 皮埃爾·法布爾皮膚化妝品公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A61K8/9789;A61K36/185;A61Q19/00;A61Q19/08;A61P17/02;A61P17/18
• 代理公司: 北京戈程知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11314
• 代理人: 程偉,韓文華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明的目的在于源自去分化、非誘發(fā)的阿甘樹細(xì)胞體外培養(yǎng)物的制劑、含有所述制劑的化妝品或皮膚病學(xué)組合物、及其用于治療皮膚老化、炎癥和愈合的用途。

背景技術(shù)

阿甘樹是一種屬于植物山欖科的樹，其學(xué)名為刺阿甘樹（Argania spinosa(L.)Scelles）。

它的習(xí)性與橄欖樹相似；其具有短且扭曲的樹干。木材非常堅硬致密。枝非常多刺，且它們有小的、披針形的、互生的、短（約2厘米長）且窄的葉，葉往往匯集成簇。葉是常綠的，但遇嚴(yán)重干旱時，葉死亡并脫落。花是雌雄同株的且為五聚體。它們集中在團傘花序中，并在五月和六月開花。它們是黃綠色的。

阿甘樹從5齡開始能結(jié)出果實。果實為黃色，橢圓形無柄漿果，約4-5厘米長。它由圍繞著堅果的漿組成，堅果含有2至3個粘在一起的扁平種子，各種子包裹著富含油的仁。

阿甘樹是摩洛哥特有的并主要位于索維拉和阿加迪爾之間的摩洛哥西南部。阿甘樹林覆蓋約830000ha。

由于阿甘樹特別堅硬的木質(zhì)，摩洛哥人們最先將其用作燃料供應(yīng)。其它主要傳統(tǒng)用途是手工初步提取的油，但現(xiàn)在使用壓榨來提取。這種油的首要用途是作為食物；另一個重要的應(yīng)用目前是用于化妝品。源自油的生產(chǎn)的漿和殘余的粕通常用于動物飼料。

許多美容產(chǎn)品是從阿甘樹開發(fā)的。已經(jīng)有若干針對源自種子的油的發(fā)明專利，例如通過溶劑獲得的油（專利Fr 2 553 788）、富含非皂化物的阿甘樹油（專利Fr 2 724 663）。

除油以外的物質(zhì)也授予了專利，例如源自油提取之后獲得的種子粕的肽；來自油和粕的肽的組合物用于治療皮膚老化有關(guān)的問題（專利Fr 2 756 183）。也有來自阿甘樹的葉、粕的蛋白質(zhì)和皂甙的發(fā)明專利=來自葉的提取物（專利EP 1 213 025）、粕蛋白質(zhì)（專利EP 1 213024）、粕皂甙（專利EP 1 430 900）。最近，專利申請EP 1 968 536經(jīng)保藏公開了來自阿甘樹果實的漿的提取物在抗老化化妝品中的用途。

因此，整個阿甘樹的組合物對于皮膚病學(xué)和/或美容用途是令人感興趣的。

阿甘樹是一種重要的資源植物，因為首先生態(tài)學(xué)上地，它是一個“生態(tài)系統(tǒng)”植物。它完全適應(yīng)干旱地區(qū)，它保護土壤免于水蝕和風(fēng)蝕，從而防止沙漠逼近摩洛哥內(nèi)。而且還因為在經(jīng)濟上，它是一種具有多種用途的樹。

它是摩洛哥的主導(dǎo)作物。因此，阿甘樹林受1925年頒布的詔令（dahir）（法令）的保護，寫道國家對于阿甘樹林享有最高權(quán)利，但當(dāng)?shù)厝罕娤碛杏靡鏅?quán)（阿甘樹下的果實、枯木、作物）。UNESCO最近將阿甘樹林列為生物圈儲備。

這就是為什么其木材或葉用于化妝品用途的利用可對此受保護的植物產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。

從植物獲得興趣分子的另一種手段是制備全能去分化的細(xì)胞培養(yǎng)物。使用去分化的植物細(xì)胞還可以避免一些化妝品產(chǎn)品開發(fā)過程中遇到的工業(yè)化問題。采用細(xì)胞培養(yǎng)物，不存在不同植物批次或收割之間興趣物質(zhì)濃度上的差異。它也是一種非破壞性的技術(shù)，相對容易且價格低廉地建立。最后，由于細(xì)胞在培養(yǎng)基中且活性化合物在培養(yǎng)基中或在細(xì)胞內(nèi)液體中，這排除了對提取的需求。因此簡單的研磨就可以獲得這些化合物。

專利申請WO03077881公開了用于局部應(yīng)用的含有至少一種體外培養(yǎng)物中去分化的且誘發(fā)的植物細(xì)胞勻漿物來合成至少一種植物抗毒素的組合物。植物材料優(yōu)選來自藤。

發(fā)明內(nèi)容

因此，本文件公開了可以去分化并誘發(fā)的植物細(xì)胞的化妝品應(yīng)用，誘發(fā)產(chǎn)生足夠量的次級代謝物使得能夠具有局部用途中的生物活性。

令人驚奇和意外的是，申請人已證明源自去分化但非誘發(fā)的阿甘樹細(xì)胞的體外培養(yǎng)物在抗老化、炎癥和愈合領(lǐng)域具有良好的化妝品和/或皮膚病學(xué)活性。

得到的結(jié)果表明，在阿甘樹的特定情況下，阿甘樹細(xì)胞培養(yǎng)物的另一種應(yīng)用（在這種情況下非誘發(fā)細(xì)胞）可能在上面提到的內(nèi)容范圍內(nèi)。

此外，按照本發(fā)明所公開的而獲得制劑可以消除對誘發(fā)步驟的需求，誘發(fā)步驟在工業(yè)上是困難且昂貴的步驟；由于細(xì)胞生長緩慢，誘發(fā)導(dǎo)致更低的生物質(zhì)產(chǎn)量。

申請WO03077881提到了進(jìn)行這種誘發(fā)的各種方式，例如UV輻射3天；二氧化碳持續(xù)24小時至2天；UV輻射和二氧化碳5天。

在本發(fā)明的框架內(nèi)進(jìn)行的方法，由來自源自阿甘樹的植物材料的細(xì)胞去分化然后在懸液中細(xì)胞培養(yǎng)組成，其可以快速地產(chǎn)生精細(xì)的、豐富的、均勻的和無菌的這種植物的生物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)使得有可能將這種植物的生物合成途徑直接應(yīng)用到細(xì)胞規(guī)模。