[實用新型]一種檢測阿維菌素殘留的膠體金試紙

有效

• 申請號: 201120450775.0
• 申請日: 2011-11-15
• 公開（公告）號: CN202383142U
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 張爽;晏磊;初海坤;徐亞軍
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531
• 代理公司: 大慶市遠東專利商標事務所 23202
• 代理人: 石曉梅

技術領域

本實用新型涉及動物源食品和果蔬類農產品中農藥殘留檢測試紙條，具體說是涉及到一種一種檢測阿維菌素殘留的膠體金試紙。

背景技術

阿維菌素（Avermectin,?AVM）是由日本科學家大村智和美國Merck公司于1976年從鏈霉菌MA-4680的發酵產物中得到的一種大環內酯抗生素類殺蟲、殺螨劑。AVM屬于昆蟲神經毒劑，主要干擾害蟲神經生理活動，刺激釋放C₂氨基丁酸，抑制神經傳導，使害蟲麻痹中毒而死，具觸殺和胃毒作用，無內吸性，是目前應用最廣泛的抗寄生蟲藥物，被廣泛的應用于農作物疾病防治和畜禽的健康養殖。

???AVM雖然屬于微生物源農藥，但其具有極強的脂溶性，不論以何種途徑給藥均能很好地被吸收，可廣泛分布于全身組織，體內持續時間長，因而消除緩慢。世界衛生組織將AVM認定為高毒化合物。研究表明，AVM對大鼠的LD₅₀為10?mg/kg，屬高毒農藥。研究還發現，AVM對哺乳動物的繁殖能力具有潛在的毒性，當實驗鼠攝入量為1.19-2.13?mg/(只﹒d)?后，雄性老鼠的生育生殖能力顯著下降，且配偶發生死胎的機率明顯提高。因此，國際上對AVM的最高殘留限量MRL（Maximum?Residue?Limits）要求非常嚴格，對其殘留指標的檢測十分重視，制定了相當嚴格的MRL值。中國農業部規定其在柑桔中MRL為20?μg/kg，葉菜中為50?μg/kg；歐盟規定其在果蔬產品、谷物等農產品中MRL為10?μg/kg；韓國規定其在蘋果中MRL為20?μg/kg，芹菜為50?μg/kg；以色列規定其在黃瓜、茄子、桃子、草莓等果蔬農產品中MRL為10?μg/kg；澳大利亞規定在蘋果、梨、番茄等產品中的MRL為10?μg/kg。

目前，AVM殘留檢測的方法主要有薄層色譜法（TLC），氣相色譜法（GC），高效液相色譜—紫外檢測法（HPLC-UV），高效液相色譜-熒光檢測法（HPLC-FLD），氣-質聯用法（HPLC-MS），液-質聯用法（LC-MS），毛細管電泳法（CE），酶聯免疫法（ELISA）等。這些方法存在著儀器設備復雜，操作步驟多，過程繁瑣，檢測費用高，需要在實驗室進行，并且要求專門的技術人員等問題。

發明內容

本實用新型的目的在于提供一種檢測阿維菌素殘留的膠體金試紙，其具有特異性強、靈敏度高、準確、方便、便宜、大眾化的檢測阿維菌素殘留的膠體金試紙。

本實用新型的一種檢測阿維菌素殘留的膠體金試紙，是由塑料基板、加樣區、金標區、反應顯色區及吸水區，上述各區帶邊緣依次重疊搭接，粘貼固定在塑料基板上；在反應顯色區上設有三條檢測帶和一條質控帶。

作為本實用新型的進一步改進，所述的金標區由金標AVM包被抗原AVM-OVA構成。

作為本實用新型的進一步改進，所述的AVM包被抗原AVM-OVA是由AVM和蛋白載體雞卵清蛋白OVA偶聯而成。

作為本實用新型的進一步改進，所述的金標AVM包被抗原AVM-OVA由膠體納米金顆粒標記AVM包被抗原AVM-OVA而成，其濃度為5μg/L~15μg/L。

作為本實用新型的進一步改進，所述的三條檢測帶包被有不同濃度梯度的AVM單克隆抗體。

作為本實用新型的進一步改進，所述的三條檢測帶分別是包被濃度為1.0?μg/L的第一檢測帶，包被濃度為2.0?μg/L的第二檢測帶，包被濃度為5.0?μg/L的第三檢測帶。

作為本實用新型的進一步改進，所述的一條質控帶包被有一定濃度的鼠抗雞卵清蛋白抗體。

作為本實用新型的進一步改進，所述的吸水區由濾紙構成。

當該試紙條用來檢測樣品時，把預處理過的樣品滴于該試紙條的加樣區，樣品由于毛細作用進行側向層析，首先經過金標區，樣品會將金標AVM包被抗原復溶，然后一起進行側向層析。當經過硝酸纖維素濾膜上的顯色檢測區時，金標AVM包被抗原會和檢測帶上的AVM單克隆抗體及質控帶上的鼠抗雞卵清蛋白抗體進行抗原抗體特異反應顯色。若樣品中含有AVM或其含量超過一定濃度（1.0?μg/L，2.0?μg/L，5.0?μg/L）時，其就會同金標AVM包被抗原競爭而與檢測帶上包被的AVM單克隆抗體結合，由于樣品中AVM與金標AVM包被抗原相比分子量小很多，層析時空間位阻也很小，從而使得樣品中AVM比金標AVM完全抗原更快更容易與AVM單克隆抗體結合，因而使得AVM包被抗原不能夠和檢測帶AVM單克隆抗體結合顯色，這樣金標AVM包被抗原會繼續層析與其余AVM單克隆抗體和抗雞卵清蛋白抗體結合顯色。