[實用新型]一種檢測嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的膠體金試紙

有效

• 申請號: 201120437276.8
• 申請日: 2011-11-08
• 公開（公告）號: CN202330437U
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 晏磊;張爽
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 大慶市建華專利事務所 23119
• 代理人: 常瑛

技術領域

本實用新型涉及的是檢測試紙，具體的是一種檢測嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的膠體金試紙。

背景技術

嗜酸氧化亞鐵硫桿菌（Acidithiobacillus?ferrooxidans，以下簡稱A.f）是一種化能自養、專性好氧、嗜酸革蘭氏陰性菌，主要生長在pH?1.0～4.5的環境中，以氧化Fe²⁺、S⁰及S^2-的化合物等來獲得生長過程所需的能量。該細菌被廣泛地應用于生物冶金、有用金屬的回收、煤的脫硫及含硫廢水的處理，是在資源微生物處理工藝中應用最多、適應性最強的一種細菌。在輸水、輸油設備、冷卻循環水管、采油井、暖氣回水管和城市排水管線中均發現有A.f存在，由于A.f能將水中亞鐵氧化成高鐵氧化物沉積于菌體外鞘或周圍粘液層中，在金屬表面形成黃褐色的結瘤，結瘤內氧進入困難而導致氧濃差電池腐蝕，進而加速管道腐蝕。此外，A.f還能將水體中的元素硫和還原性硫化物氧化，最終產生硫酸，從而腐蝕金屬、混凝土構件等，其腐蝕行為給地下管線、海底電纜、采油設備、工業注水系統等設施帶來嚴重危害，造成經濟上的損失。因此人們對其有效檢測方法也越來越關注。

目前，A.f存在與否的檢測方法主要有培養富集后檢測亞鐵離子的氧化性能法、多管發酵法、測試瓶法、基于分子生物學技術的檢測16S?rRNA基因和亞鐵氧化酶基因法。這些方法都需要對樣品中的A.f進行富集培養，培養基的配置復雜、操作程序繁瑣、檢測時間長、對測試環境和操作人員的素質要求極高。近年來，不依賴于培養的分子生物學技術也開始應用與A.f的檢測，根據16S?rRNA基因設計熒光探針，然后通過分子雜交來判斷樣品中A.f的含有情況。此外，根據銅藍蛋白（Rusticyanin,?以下簡稱Rus）編碼基因rus建立的含有兩對引物的PCR法也被應用于A.f的檢測。這兩種方法雖然具有一定的靈敏性和特異性，但其試劑配制復雜、對儀器要求高、測試成本高、并且需要專門的技術人員來完成。

Rus是A.f亞鐵氧化過程中的一種重要的蛋白，每一分子的蛋白包含一個銅原子，分子量為16.5?kDa。在鐵生長環境中A.f菌體內含有高濃度的Rus，可以達到可溶性蛋白總量的5%。從不同A.f菌株中分離的Rus，其氨基酸序列同源性非常高，并且在其它革蘭氏陰性細菌中尚未發現有Rus的存在，因此Rus可以作為A.f的一個很好的檢測標志。需要發明一種利用Rus蛋白來檢測A.f是否存在的裝置。

發明內容

本實用新型的發明目的是針對上述問題提供一種檢測嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的膠體金試紙，解決目前檢測A.f是否存在的方法過于復雜，成本較高的問題。

本實用新型通過以下技術方案來實現：一種檢測嗜酸氧化亞鐵硫桿菌的膠體金試紙，該試紙包括塑料底板、微孔濾膜、玻璃纖維素膜、硝酸纖維素膜、濾紙，塑料底板上依次貼有微孔濾膜、玻璃纖維素膜、硝酸纖維素膜和濾紙；所述的玻璃纖維素膜上有膠體金顆粒標記的Rus單克隆抗體Ⅰ，硝酸纖維素膜上有Rus單克隆抗體Ⅱ條帶。

上述的硝酸纖維素膜上還有羊抗鼠IgG條帶，Rus單克隆抗體Ⅱ條帶和羊抗鼠IgG條帶平行設置，且Rus單克隆抗體Ⅱ條帶位于膠體金顆粒標記的Rus單克隆抗體Ⅰ和羊抗鼠IgG條帶之間。

采用上述技術方案的積極效果：本實用新型利用抗原抗體反應和免疫層析技術的原理，將Rus單克隆抗體制備到試紙上，通過Rus單克隆抗體會與Rus結合的特性，通過膠體金顆粒顯色，檢測出Rus的存在，進而判斷A.f是否存在；同時，增加了羊抗鼠IgG條帶，可以靈敏地檢測出本實用新型是否失效，方便使用。

附圖說明

圖1是本實用新型的俯視圖；

圖2是本實用新型的裝配示意圖。

圖中：1塑料底板、2微孔濾膜、3玻璃纖維素膜、4硝酸纖維素膜、5濾紙、6?Rus單克隆抗體Ⅱ條帶、7羊抗鼠IgG條帶。

具體實施方式：下面結合附圖對本實用新型作進一步說明：