[實用新型]一種熒光定量檢測沙丁胺醇的試劑盒

有效

• 申請號: 201120403852.7
• 申請日: 2011-10-21
• 公開（公告）號: CN202433384U
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 王繼華;唐海波;劉曉云
• 申請（專利權）人: 廣州萬孚生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N21/64
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;曾旻輝

技術領域

本實用新型屬于醫學檢驗領域，具體地說，本實用新型涉及一種熒光定量檢測沙丁胺醇（SAL）的免疫層析檢測試劑盒。?

背景技術

沙丁胺醇，化學名稱為1-(4-羥基一3羥甲基苯基)-2一(叔丁氨基)乙醇，是一種能與腎上腺素能受體結合的藥物，臨床上主要用于治療哮喘、支氣管痙攣等。將SAL作為飼料添加劑使用，能顯著促進動物生長，增加飼料轉化率和瘦肉率口，長期超量使用，則會在動物組織中蓄積，人食用了這種動物產品后會引發中毒。2O世紀9O年代初歐洲發生了多起興奮劑中毒事件，我國從1998年至今也有多起中毒事件發生，因此歐盟各國及我國均做出相應規定禁止其作為飼料添加劑使用。但受經濟利益驅使，仍存在大量非法使用的現象。因此監督、檢測動物產品中與飼料中的興奮劑就成為關系消費者健康的亟待解決的問題。?

β-興奮劑中最常作為促生長劑使用的是克倫特羅，但隨著對克倫特羅檢測力度的加大，非法使用者開始轉向其他替代品。由于SAL與克倫特羅的促生長作用相差不大，其在動物體內的消除時間比克倫特羅短，毒性較弱，因此，SAL就成為克倫特羅之后最主要的替代品。但國內對于SAI的免疫檢測方法研究還處于起步階段，針對β-興奮劑類藥物的檢測方法如氣一質聯用法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)以及液一質聯用法(LC-MS)等，具有準確可靠、重復性強?等有點，但是這些方法的缺點同樣突出，如儀器昂貴、操作復雜、便攜性差等，因而不利于大范圍的推廣應用及高通量檢測。因此，本專利建立一種簡便、可靠、快速、靈敏檢測SAL殘留的檢測方法，以便對動物組織中的SAI殘留進行監控。?

申請號為CN201010235592.7的發明專利，涉及β-興奮劑萊克多巴胺、沙丁胺醇二元檢測測試條及其制備方法，可有效解決能快速、簡便地同時檢測出β-興奮劑萊克多巴胺、沙丁胺醇的問題，方法是：基材PVC板上面自后向前依次設置有引水玻璃纖維、載體玻璃纖維、硝酸纖維膜和吸水棉漿板，引水玻璃纖維、載體玻璃纖維和吸水棉漿板上面覆蓋有由前部覆蓋膜和后部覆蓋膜組成的覆膜，可用于同時檢測β-興奮劑萊克多巴胺、沙丁胺醇。但此方法對于較高的靈敏度也不容易實現，而且不可以作為定量測試。?

申請號為CN200810249803.5的發明專利，公開了一種沙丁胺醇的化學發光酶聯免疫檢測試劑盒，包括盒體，設在盒體內的各孔包被有以克倫特羅與卵清蛋白偶聯制成的包被抗原的酶標板和設在盒體內的沙丁胺醇的多克隆抗體、酶標二抗即辣根過氧化酶標記的羊抗兔的抗體、沙丁胺醇系列標準溶液、濃縮磷酸鹽緩沖液、濃縮洗滌液、發光液。其試劑盒具有靈敏度高、重復性好、簡便快速、準確的特點，與傳統的比色ELISA法比較，靈敏度可以提高一個數量級，有望在動物源性食品(如奶樣、動物組織樣)和尿樣的沙丁胺醇殘留檢測中發揮重要作用，但是，這種方法還不要較長時間的的反應，不利于現場測試。?

實用新型內容

本實用新型的目的在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種成本低廉、操作簡便、靈敏性高的一種熒光檢測沙丁胺醇試劑盒。?

為實現上述目的，本實用新型采取了以下技術方案：?

一種熒光定量檢測沙丁胺醇的免疫層析試劑盒，該試劑盒包括有試紙條和裝有熒光標記液的試劑瓶，所述試紙條由樣品墊、硝酸纖維素包被膜、吸水紙順次搭接粘貼在底板上構成；所述硝酸纖維素包被膜包括檢測區和質控區；所述檢測區包被有0.18～1.80ug的沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯物（SAL-BSA偶聯物），所述質控區包被有0.18-1.8ug的抗兔IgG；所述熒光標記液中含有濃度分別為0.2~1ug/ml的熒光標記SAL抗體（沙丁胺醇抗體）和熒光標記兔IgG。?

所述熒光標記液的激發波長（Ex）為310～550nm，發射波長（Em）為340～620nm。?

本實用新型所述的沙丁胺醇的免疫層析試紙盒的檢測原理是競爭法，熒光素分子或熒光膠乳微粒與SAL抗體共價結合。將檢測樣本（尿樣或提取液）加入熒光標記物中，其熒光標記SAL抗體可與尿液中的SAL結合，形成復合物；而包被在硝酸纖維素膜上檢測區（T）的SAL-BSA偶聯物也競爭結合熒光標記SAL抗體。當含SAL樣本與熒光標記物混合后滴加至試紙條的上，在層析作用下混合液沿著硝酸纖維素膜向前移動，樣本中所含SAL量越多，可與T區SAL-BSA偶聯物結合的熒光標記的抗體越少，從而使T區測得熒光檢出值降低。通過熒光檢測儀掃描T區熒光信號強度，可檢測出樣本中SAL含量。?