[實用新型]一種檢測馬腦炎病毒抗體的金標免疫層析系統

有效

• 申請號: 201120367831.4
• 申請日: 2011-09-29
• 公開（公告）號: CN202256349U
• 公開（公告）日: 2012-05-30
• 發明（設計）人: 王靜;孫時;宋峰林;楊宇;楊永莉;王旺
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569
• 代理公司: 北京中創陽光知識產權代理有限責任公司 11003
• 代理人: 尹振啟

技術領域

本實用新型涉及一種可同時檢測東方馬腦炎病毒抗體、西方馬腦炎病毒抗體、委內瑞拉馬腦炎病毒抗體的金標免疫層析系統。

背景技術

東方馬腦炎病毒（Eastern?Equine?Encephalitis?Virus,?EEEV）屬?A組蟲媒病毒披膜病毒科甲病毒屬，含單股正鏈?RNA，該病毒主要是通過蚊媒傳播，而且可以經含有病毒的氣溶膠通過呼吸道感染人類，其引起的腦膜腦炎，是一種急性、病毒性、人畜共患自然疫源性的傳染性疾病。感染后發病率高，傳染性強，致死率高，缺乏有效的預防方法，病愈后多留有后遺癥，對人群危害性大，所以被國際社會列為防制生物恐怖的主要病種之一,備受世界各國關注。

我國對東方馬腦炎病毒生物戰劑的偵檢和醫學防護等研究尚處于空白，更缺乏中、長期研究發展規劃，針對東方馬腦炎病毒的恐怖襲擊尚無配套診斷試劑和有效免疫治療和防護手段，所以發明快速、簡便、能適合現場檢測的檢測東部馬腦炎病毒的方法刻不容緩，對我國在國際社會上的形象和檢測地位具有非常重要的意義。

西方馬腦炎（Western?Equine?Encephalitis，簡寫為WEE）（以下簡稱為西馬）是由西馬病毒引起的能使人類和馬等多種動物致死性的一種急性病毒性腦炎。西馬病毒可經呼吸道傳播感染，但主要是由蚊蟲傳播，西馬病毒的抗原性是由囊膜糖蛋白E1和馬腦炎病毒決定的。E1含有一個中和抗原位點，感染西馬病毒后會產生相應抗體，所以檢測西馬病毒E1C抗體即可得知是否有感染該病毒。1990年何海懷等從新疆烏蘇縣采集的按蚊和博樂縣的全溝硬蜱中分離出西馬病毒。呂新軍等在對我國人體血清調查中發現，西馬病毒抗體陽性率為2.71%。這些情況都證實了西馬病毒在我國的存在，說明了西馬病毒有可能成為我國感染性疾病的新病原之一。

委內瑞拉馬腦炎病毒（Venezuelan?equine?encephalitis?virus，簡寫為VEEV）（以下簡稱為委馬病毒）是屬于披膜病毒科、甲病毒屬，基因組為單股正鏈RNA的可引起委內瑞拉馬腦炎的烈性病毒。該病毒主要由蚊蟲吸血傳播，可引起馬匹、人類或其他動物患病，研究表明，氣溶膠也是一種較重要的傳播途徑。該病毒有較高的發病率和致死率，病愈后還會留有后遺癥，已被美國疾病預防控制中心列為生物恐怖劑。雖然我國境內還未有發現委內瑞拉馬腦炎病毒的報道，但是隨著國際旅游和貿易交往日益頻繁，攜帶此病毒傳入我國的風險系數以及潛在的生物恐怖襲擊的危險日益增加，所以我國國內尤其是出入境口岸應提高警惕，加強對委馬病毒的檢測，防止該病毒在我國的暴發和流行。

金標免疫層析法（GICA）是20世紀90年代以來在單克隆抗體技術、金標技術和新材料技術基礎上發展起來的一項新型體外診斷技術。近年來發展迅速，在生物醫學領域特別是醫學檢驗中得到了廣泛應用。該技術主要是將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在NC?膜上，金標標記試劑吸附在結合墊上，當待測樣品加到試紙條一端的樣品墊上后，通過虹吸原理向前移動，溶解結合墊上的金標標記試劑后相互反應，再移動至固定的抗原或抗體的區域時，待測物和金標試劑的復合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，通過目測的金標標記物得到直觀的顯色結果。而流離標記物則越過檢測帶，達到與結合標記物自動分離的目的。由于快速簡便、準確，具有高度特異性和高敏感性，結果直觀可靠，而且試劑和樣品用量極少，每個樣品只需1-2μl,無需儀器設備，簡化了煩瑣的常規操作過程，同時也減小了因操作引起的誤差，金標免疫層析技術是一種目前發展最快的復合型免疫層析技術。金標本身為紅色，不需要加入顯色試劑，對人體無毒害。目前該技術已經在臨床醫學檢驗廣泛應用，被認為是微生物和傳染病及寄生蟲病診斷中最有前途的新技術之一。

實用新型內容

針對現有情況存在的問題，本實用新型的目的在于提供一種快速定性、特異性和敏感性高、可同時檢測東方馬腦炎病毒抗體、西方馬腦炎病毒抗體、委內瑞拉馬腦炎病毒抗體的金標免疫層析系統。

為實現上述目的，本實用新型一種檢測馬腦炎病毒抗體的金標免疫層析系統，包括用于定量檢測的金標免疫分析儀、用于檢測東方馬腦炎病毒抗體的金標免疫試紙條A、用于檢測西方馬腦炎病毒抗體的金標免疫試紙條B、用于檢測委內瑞拉馬腦炎病毒抗體的金標免疫試紙條C，三個試紙條均包括反應支撐物、緊密連接于反應支撐物上表面中部的硝酸纖維膜，硝酸纖維膜起始端的上表面與吸水墊部分重疊連接、硝酸纖維膜末端的上表面與金標抗體保護膜部分重疊連接，金標抗體保護膜的上表面部分重疊連接有樣品墊；