[實(shí)用新型]肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)和凍存的裝置

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201120211921.4
• 申請(qǐng)日: 2011-06-22
• 公開（公告）號(hào): CN202081111U
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杭化蓮;卞建民;禹亞彬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京第一醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12M3/00
• 分類號(hào): C12M3/00;A01N1/02
• 代理公司: 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 32206
• 代理人: 周新亞

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種裝置，特別是一種主要用于進(jìn)行肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)和冷凍的裝置，屬于專用于醫(yī)學(xué)目的的容器。

背景技術(shù)

慢性肝炎肝硬化、中晚期肝癌的病人常常死于終末期肝功能衰竭，應(yīng)用生物人工肝以及肝臟移植等療法來治療肝臟衰竭最近幾年來取得了顯著的成就。生物人工肝支持系統(tǒng)借助體外循環(huán)裝置清除體內(nèi)各種有害物質(zhì)并且補(bǔ)充體內(nèi)必需的蛋白質(zhì)和凝血因子，為患者提供短暫的肝功能支持；肝移植療法則是借助同種或異種肝臟移植到患者體內(nèi)發(fā)揮功能來達(dá)到治療目的。但上述兩種治療方法都面臨著缺乏理想肝細(xì)胞源的問題，而且并不是每次獲取的肝細(xì)胞量都能達(dá)到治療的要求，因此探索一種符合實(shí)際情況的肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)、凍存及復(fù)蘇方法是提高肝衰患者治療效果的重要前提。

目前細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)常使用生物反應(yīng)器，常見的有攪拌式、旋轉(zhuǎn)式、灌注式等。但生物反應(yīng)器構(gòu)造復(fù)雜、價(jià)格昂貴、使用不方便等缺點(diǎn)使其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用發(fā)展緩慢。

在本發(fā)明之前，常規(guī)使用的細(xì)胞冷凍降溫方法大致分為三種：常規(guī)冷凍、程序降溫儀冷凍、冷凍盒冷凍。其中使用常規(guī)方法（即：4℃放置30min，-20℃冷凍30min，最后-80℃過夜，次日投液氮）對(duì)原代肝細(xì)胞冷凍效果較差；而采用計(jì)算機(jī)程序降溫儀冷凍操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、費(fèi)力；采用冷凍盒進(jìn)行冷凍操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、省時(shí)，冷凍效果與前者相近。上述幾種冷凍方法均是將細(xì)胞混于冷凍保護(hù)液并置于冷凍小管中冷凍保存，這種方法對(duì)一般分裂傳代細(xì)胞進(jìn)行少量冷凍，效果較好且方便，細(xì)胞復(fù)蘇后可傳代培養(yǎng)并用于細(xì)胞學(xué)或分子生物學(xué)研究，但針對(duì)以治療為目的的肝細(xì)胞卻存在一定缺陷。首先，肝細(xì)胞用來治療所需量大，常規(guī)采用冷凍管冷凍的方法數(shù)量少、操作過程繁瑣，無法達(dá)到大規(guī)模冷凍的要求；其次，常規(guī)采用冷凍方法無法滿足一次性急需大量肝細(xì)胞的需求，更不能達(dá)到成品化輸出的目的。

發(fā)明內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的就在于克服上述現(xiàn)有裝置的不足之處，為滿足肝衰患者急需大量肝細(xì)胞的要求，提供一種適合醫(yī)院使用的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單合理，操作使用簡(jiǎn)單方便的肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)和冷凍的裝置。

本實(shí)用新型的肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)和冷凍的裝置，主要由培養(yǎng)盒和冷凍盒組成，所述培養(yǎng)盒包括盒體、至少2層平板、殼聚糖納米纖維膜、平板小孔、上塞蓋、支架管、支架側(cè)孔和下塞蓋，其中，支架管裝在盒體的上口與下口之間，平板經(jīng)中心孔分別安裝在支架管上，殼聚糖納米纖維膜貼在平板上，平板小孔分布在平板上，支架側(cè)孔分布在支架管壁上，上塞蓋和下塞蓋分別裝在盒體的上口與下口上；所述冷凍盒包括冷凍盒體、冷凍劑和冷凍盒蓋，冷凍劑裝在冷凍盒體內(nèi)，冷凍盒蓋蓋裝在冷凍盒體的盒口上；所述培養(yǎng)盒置于冷凍盒內(nèi)的冷凍液中。

為了便于將裝有培養(yǎng)盒的冷凍盒吊于液氮罐中冷凍，可在冷凍盒蓋上設(shè)有吊耳和吊繩，吊耳安裝在冷凍盒蓋上，吊繩系扣在吊耳上，為了提高密封性能，可在冷凍盒蓋與冷凍盒體之間裝有耐低溫密封圈。

上述培養(yǎng)盒體選用耐低溫的PIR聚異氰脲酸酯泡沫盒，冷凍液選用異丙醇或丙二醇，耐低溫密封圈選用硅橡膠密封圈。

本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)和效果在于：能將一次分離所獲肝細(xì)胞按要求直接接種于培養(yǎng)盒中的殼聚糖多層平板上進(jìn)行擴(kuò)增，實(shí)現(xiàn)大規(guī)模培養(yǎng)，大幅度減少了每次分離肝細(xì)胞的浪費(fèi)，而且培養(yǎng)盒直接放入盛有異丙醇或丙二醇的冷凍盒中凍存，培養(yǎng)盒內(nèi)的多層平板表面上的殼聚糖納米纖維充分模擬體內(nèi)微環(huán)境能促進(jìn)肝細(xì)胞粘附，并能提高解凍后肝細(xì)胞的細(xì)胞活力和功能，解決了常規(guī)冷凍肝細(xì)胞裝置使細(xì)胞貼壁不穩(wěn)定而容易脫落和難以提供大量肝細(xì)胞等問題。還具有結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理，操作使用簡(jiǎn)單方便易行等優(yōu)點(diǎn)，適合需要為肝衰患者提供大量肝細(xì)胞的醫(yī)院使用。

附圖說明

圖1是本實(shí)用新型的一種結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2是本實(shí)用新型的另一種結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實(shí)施方式

參見附圖1和2，本實(shí)用新型的肝細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)和冷凍的裝置，主要由培養(yǎng)盒和冷凍盒組成，所述培養(yǎng)盒包括盒體1、至少2層平板2、殼聚糖納米纖維膜3、平板小孔4、上塞蓋5、支架管6、支架側(cè)孔7和下塞蓋8，其中，支架管6裝在盒體1的上口與下口之間，平板2經(jīng)中心孔分別安裝在支架管6上，殼聚糖納米纖維膜3貼在平板2上，平板小孔4分布在平板2上，支架側(cè)孔7分布在支架管6壁上，上塞蓋5和下塞蓋8分別裝在盒體1的上口與下口上；所述冷凍盒包括冷凍盒體11、冷凍劑10和冷凍盒蓋9，冷凍劑10裝在冷凍盒體11內(nèi)，冷凍盒蓋9蓋裝在冷凍盒體11的盒口上；所述培養(yǎng)盒置于冷凍盒內(nèi)的冷凍液中。