[實用新型]一種三聚氰胺免疫層析檢測試紙條

有效

• 申請號: 201120164139.1
• 申請日: 2011-05-20
• 公開（公告）號: CN202110174U
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發明（設計）人: 王繼華;唐海波
• 申請（專利權）人: 廣州萬孚生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;曾旻輝

技術領域

本實用新型屬于醫學檢驗領域，具體地說，本實用新型涉及一種三聚氰胺免疫層析檢測試紙條。

背景技術

三聚氰胺(英文名Melamine)，簡稱三胺，又叫2，4，6-三氨基-1，3，5-三嗪、1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺、2，4，6-三氨基脲、蜜胺、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺，是一種三嗪類含氮雜環有機化合物，是重要的氮雜環有機化工原料。在食品工業中，需要測定食品的蛋白質含量，而直接測量蛋白質技術上比較復雜，所以通常采用凱氏定氮法測定蛋白質含量，即通過測定食品中氮的含量來間接推算蛋白質的含量。由于三聚氰胺與蛋白質相比含有更多的氮原子，所以添加在食品中的三聚氰胺可以造成食品蛋白質含量較高的假象，因而被不法商販所利用。三聚氰胺被攝入人體后，通過小腸吸收進入血液循環并最終進入腎臟，形成腎結石，尤其對于哺乳期的嬰兒，更容易造成結石。

三聚氰胺的檢測目前主要采用儀器檢測的方法。主要方法有：GC-MS法、Spectra-Quad在線檢測、超高效液相色譜-電噴霧串聯質譜法、反相高效液相色譜法、高效液相色譜-二極管陣列法、高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜-四極桿質譜聯用、固相萃取與高效液相色譜聯用、液相色譜串聯質譜法(LC-MSMS)等。這些儀器方法價格昂貴，且方法操作復雜，需受過專門訓練的人員才能操作，而且存在著適用范圍窄、設備昂貴、成本高等問題。20世紀80年代興起的膠體金免疫層析檢測技術，基于免疫層析原理，操作簡便快捷，結果清晰，無需復雜的實驗技能和設備，特別適用于現場檢測。但是膠體金技術只能實現定性檢測，且膠體金的制備成本較高。

發明內容

本實用新型的目的在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種成本低廉、結構簡單、操作簡便、靈敏性高的三聚氰胺免疫層析檢測試紙條。

為實現上述目的，本實用新型采取了以下技術方案：

一種三聚氰胺免疫層析檢測試紙條，包括底板，在所述底板上依次相互搭接有樣品墊、涂覆有彩色膠乳顆粒標記的三聚氰胺抗體的玻璃纖維膜標記墊、硝酸纖維素包被膜和吸水紙，所述包被膜上設有質控線和檢測線，所述檢測線由偶聯有載體蛋白的三聚氰胺全抗原包被。

所述質控線由抗鼠抗體IgG包被。

所述質控線和檢測線之間的距離為2-5mm；更優選地，所述質控線和檢測線之間的距離為3.5mm，非特異性干擾性小。

三聚氰胺為小分子化合物，抗原性弱，不能夠刺激機體產生免疫應答，必須把其連接到大分子物質(如載體蛋白質)上，才能形成較為理想的免疫原。常用的蛋白質偶聯方法主要有碳二亞胺(EDC)法、混合酸酐法(MA)、戊二醛法、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)法、琥珀酸酐法和重氮法等。本實用新型的三聚氰胺免疫層析檢測試劑條是建立在免疫層析的競爭抑制性原理上，利用化學合成的方法將三聚氰胺連接到大分子載體蛋白上合成三聚氰胺人工全抗原；采用載體蛋白偶聯的三聚氰胺全抗原制備高靈敏度的三聚氰胺抗體；利用彩色膠乳標記技術標記三聚氰胺抗體，載體蛋白偶聯的三聚氰胺人工全抗原組成層析裝置，對樣本中的三聚氰胺小分子進行定性檢測。

當試紙條以樣品墊末端浸入樣本后，樣品溶液沿著試紙條通過毛細作用從下向上流動，溶解標記墊上涂覆的彩色膠乳顆粒標記的三聚氰胺抗體。如果待測的樣品中不含有三聚氰胺時，彩色膠乳顆粒標記的三聚氰胺抗體會和包被在硝酸纖維素包被膜的檢測線處的偶聯有載體蛋白的三聚氰胺全抗原發生反應，從而聚集彩色膠乳顆粒，在檢測線處顯色，未與三聚氰胺全抗原反應的彩色膠乳顆粒標記的三聚氰胺抗體繼續向前，與質控線上的抗鼠抗體發生反應，在質控線處顯色，因此在硝酸纖維素包被膜上呈現兩條色帶，表示樣品為三聚氰胺陰性；若待測樣品中含有三聚氰胺，則彩色膠乳顆粒標記的三聚氰胺抗體首先與樣品中的小分子發生反應，檢測線處不顯色，當反應后的彩色膠乳顆粒標記的抗體和抗原復合物流動到質控線處時，與質控線處包被的抗鼠抗體反應，質控線處顯色，硝酸纖維素包被膜上只呈現一條色帶，說明檢測樣品為陽性。由此可見，無論檢測樣品中是否含有三聚氰胺小分子，質控線處均顯色，如果質控線無色帶產生，則說明試紙條失效或者操作有誤。

與現有技術相比，本實用新型具有以下有益效果：