[發明專利]一種來源于人肺多形性癌的細胞株及其制備方法有效
| 申請號： | 201110460803.1 | 申請日： | 2011-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN102433306A | 公開（公告）日： | 2012-05-02 |
| 發明（設計）人： | 何建行;李慧靈 | 申請（專利權）人： | 廣州呼吸疾病研究所;何建行;李慧靈 |
| 主分類號： | C12N5/09 | 分類號： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 廣州三環專利代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝傳鑫 |
| 地址： | 510120 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 來源于 人肺多形性癌 細胞株 及其 制備 方法 | ||
1.一種來源于人肺多形性癌的細胞株，其特征在于，命名為人肺癌細胞株L1022，保藏號為CCTCC?NO：C201032。
2.如權利要求1所述的來源于人肺多形性癌的細胞株，其特征在于，所述細胞株在電鏡下觀察顯示，癌細胞整齊排列成腔樣結構，游離面絨毛長，舒展；細胞間連接豐富；核異型性高，怪異型核較多，核內異染色質少；線粒體、內質網與溶酶體數量眾多，其他細胞器明顯稀少。
3.如權利要求1所述的來源于人肺多形性癌的細胞株，其特征在于，所述細胞株在倒置顯微鏡下觀察可見細胞體積大，核大，胞漿豐富，細胞間連接緊密，與平皿之間緊密貼附，不易消化分散。
4.如權利要求1所述的來源于人肺多形性癌的細胞株，其特征在于，所述細胞株的體外倍增時間為55.335h。
5.如權利要求1所述的來源于人肺多形性癌的細胞株，其特征在于，所述細胞株的蛋白表達特征為vimentin、CK7和TTF-1均表達陽性，表皮生長因子受體EGFR的表達也呈陽性。
6.一種來源于人肺多形性癌的細胞株的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)組織塊機械解離：將切除的人肺多形性癌組織解離，清洗去除雜質，分離肺癌實質組織，去除正常肺泡及支氣管組織和間質組織后，得到剩余的組織；
(2)膠原酶消化：將步驟(1)得到的剩余的組織切成組織片，清洗，然后向組織片加入膠原酶，孵育，過濾，然后收集腫瘤細胞，進行接種培養，得到存活細胞；
(3)對步驟(2)得到的存活細胞進行純化，去除纖維細胞等雜質，純化后的肺癌細胞連續培養并傳代大于12個月，即得細胞株。?
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