[發明專利]新的螨變應原

無效

• 申請號: 201110458410.7
• 申請日: 2005-04-07
• 公開（公告）號: CN102516383A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 津久井利廣;辻本元;巖淵成紘
• 申請（專利權）人: 日本全藥工業株式會社
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;劉健

1.來源于粉塵螨并且具有以下特征的螨變應原：

(i)所述螨變應原的分子量通過SDS-PAGE測量是150kDa-250kDa；

(ii)所述螨變應原的N末端氨基酸序列如SEQ?ID?NO：19所示；

(iii)所述螨變應原包含由SEQ?ID?NO：s4、10和12所示的氨基酸序列組成的片段；和

(iv)所述螨變應原與IgE反應。

2.權利要求1的螨變應原，其具有以下另外的特征：

(v)當通過由等電點電泳和SDS-PAGE組成的2-D(二維)電泳進行分析時，所述螨變應原在分子量150kDa-250kDa和pH?4.5的斑點被檢測到。

3.權利要求1的螨變應原，其中氨基酸序列PEPTTKT重復至少11次。

4.權利要求1的螨變應原，其通過以下步驟獲得：

(i)從粉塵螨的螨體提取螨poly(A)mRNA；

(ii)使用步驟(i)的螨poly(A)mRNA，通過逆轉錄產生cDNAs；

(iii)使用引物N-1(5’-GAYGAYGTNTTRAARCARACNGARGAR-3’(SEQ?ID?NO：20)：Y＝C或T，N＝A或C或G或T，并且R＝A或G)作為正向引物，具有SEQ?ID?NO：25的核苷酸序列的引物作為反向引物，并且使用通過步驟(ii)獲得的螨cDNA作為模板，通過PCR擴增基因；

(iv)將通過步驟(iii)獲得的DNA片段導入表達載體，并且用該載體轉化宿主大腸桿菌；

(v)通過培養步驟(iv)獲得的宿主大腸桿菌，生產具有150kDa-250kDa的分子量并且具有SEQ?ID?NO：19所示的N末端序列的蛋白；

(iv)用步驟(v)獲得的蛋白免疫小鼠；

(vii)從步驟(vi)的免疫的小鼠獲得抗螨變應原的多克隆抗體；

(viii)使通過步驟(vii)獲得的多克隆抗體接觸從粉塵螨提取的抗原；

(ix)收集與通過步驟(vii)獲得的多克隆抗體結合的抗原。

5.權利要求4的螨變應原，其中氨基酸序列PEPTTKT重復至少11次。