[發(fā)明專利]一種提取純化植物大分子活性成分的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110458300.0
• 申請日: 2011-12-31
• 公開（公告）號: CN102584968A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 許宏華;韓超
• 申請（專利權(quán)）人: 上海善力健生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C07K1/34;C08B37/00
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種提取純化植物大分子活性成分的方法。

背景技術(shù)

隨著植物化學(xué)研究的深入，植物大分子活性物質(zhì)越來越受到醫(yī)療保健界的關(guān)注。植物大分子包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、糖肽、多糖、多肽、酶類及多酚類物質(zhì)。研究表明，植物大分子具有很強(qiáng)的生物活性，如：免疫調(diào)節(jié)、抗癌、降血糖、降血脂、降血壓、抗氧化等功效。因此，在天然植物藥的研發(fā)生產(chǎn)中，對植物大分子的運(yùn)用越來越廣泛。

在傳統(tǒng)針對植物大分子的制備方法包括：水提醇沉法，有機(jī)溶劑法、樹脂吸附法等。但是，這些傳統(tǒng)方法都存在高溫、有機(jī)溶劑殘留以及強(qiáng)酸堿的問題。這些因素都會影響植物大分子的結(jié)構(gòu)，尤其是當(dāng)破壞大分子三維立體結(jié)構(gòu)以后，其功效就會迅速喪失失活，從而影響產(chǎn)品功效。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種可大幅度高產(chǎn)品的功效的提取純化植物大分子活性成分的方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)將植物藥材用水提取，得提取液；

(2)提取液澄清過濾得清液；

(3)清液進(jìn)行微孔膜精濾，得精濾液；

(4)精濾液進(jìn)行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；

(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。

步驟(1)植物藥材包括枸杞、茶葉、青錢柳、麥冬、石斛或余甘子。

步驟(1)所述的植物藥材用水提取為：按植物藥材與水重量比1∶16混合進(jìn)行攪拌提取，攪拌速度為20-30rpm。

步驟(2)所述的澄清過濾為：將提取液靜置12h，抽取上層清液在轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm下進(jìn)行高速離心，得清液。

步驟(3)所述的微孔膜的孔徑為0.1-0.2μm。

步驟(4)所述的精濾液進(jìn)行活性分子純化截流是：根據(jù)植物藥材大分子活性的分子量大小選擇與其分子量相匹配的膜進(jìn)行過濾。

步驟(4)所述的純化濃縮液低溫干燥的溫度為：35℃-40℃，干燥時間為8小時。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用水作為提取液，而且在低溫下進(jìn)行干燥，不會影響植物大分子的結(jié)構(gòu)，尤其是不會破壞大分子三維立體結(jié)構(gòu)，可以保持活性，從而大大提高了其功效。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實施例1

一種提取純化枸杞中大分子活性成分糖蛋白的方法，該方法包括以下步驟：

(1)將枸杞用水提取，得提取液；

(2)提取液澄清過濾得清液；

(3)清液用孔徑為0.1-0.2μm微孔膜進(jìn)行精濾，得精濾液；

(4)由于枸杞糖蛋白的分子量大小在70k-80k范圍內(nèi)，因此選用分子量為50k和100k的超濾膜進(jìn)行分離純化得到枸杞糖蛋白純化濃縮液；

(5)純化濃縮液低溫干燥得到枸杞糖蛋白。

將本發(fā)明產(chǎn)品枸杞糖蛋白與市場上銷售的同類產(chǎn)品進(jìn)行活性比較結(jié)果如下：

兩個劑量組：即上述方法制得的枸杞糖蛋白5mg、市售枸杞糖蛋白500mg/kg.BW。同時設(shè)空白對照組。采用SPF級昆明種小鼠，連續(xù)經(jīng)口灌胃給予，30天后開始實驗。實驗結(jié)果顯示：本發(fā)明5mg劑量與市售500mg作用相當(dāng)，1)能明顯增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力；2)能明顯增強(qiáng)二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)；3)能明顯升高小鼠血清溶血素含量；4)能明顯增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能；5)能明顯增強(qiáng)小鼠碳廓清能力；6)能明顯增強(qiáng)抗體生成細(xì)胞能力。

由此可見，本發(fā)明方法制得的枸杞糖蛋白可以明顯提高生物活性。

實施例2

一種提取純化茶葉中大分子活性成分茶多糖的方法，該方法包括以下步驟：

(1)將粗老茶用水提取，得提取液；

(2)提取液澄清過濾得清液；

(3)清液用孔徑為0.1-0.2μm微孔膜進(jìn)行精濾，得精濾液；

(4)由于茶多糖的分子量大小在40k左右，因此選用分子量為30k和50k的超濾膜進(jìn)行分離純化得到茶多糖純化濃縮液；

(5)純化濃縮液低溫干燥得到活性茶多糖。

將本發(fā)明方法制得的活性茶多糖10mg/kg與市售同類產(chǎn)品500mg/kg進(jìn)行降血糖活性比較：

由此可見，本發(fā)明方法制得的茶多糖降血糖活性明顯大幅度提高。

綜上所述：本發(fā)明方法能夠更好的保留植物活性大分子的活性，使其產(chǎn)品功效更顯著。