[發明專利]一種制備高純度積雪草苷的方法

無效

• 申請號: 201110457991.2
• 申請日: 2011-12-31
• 公開（公告）號: CN102532244A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 韋萬興;唐新宗;周敏;凌秀榮
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 王素娥

技術領域

本發明是一種從天然植物中提取有效成份的技術領域。具體是一種制備高純度積雪草苷的方法。

技術背景

積雪草為傘形科植物積雪草(Centella?asiatica(L)Urban)的干燥全草或帶根全草，又稱雷公根、馬蹄草、落得打，常年可采，資源豐富，生長在東南亞、澳大利亞、南非和中非熱帶地區，在很多國家的醫藥領域中應用已有悠久歷史。積雪草性寒，味苦，具有清熱利濕、解毒消腫之功效，主要用于濕熱黃疸、中暑腹瀉、癰腫瘡毒、跌打損傷等癥。積雪草中化學成分主要包括積雪草苷、羥基積雪草苷、參枯尼苷、積雪草酸、積雪草糖、山柰酚、槲皮素等。近年研究發現，積雪草提取物可有效促進皮膚損傷、局部膠原合成代謝，并在皮膚損傷后的組織修復方面有重要作用。近年來研究還發現，積雪草具有抗氧化、抗抑郁、保肝、抑制腫瘤細胞增生等作用。

積雪草中積雪草苷分離方法主要包括硅膠柱層析法、大孔樹脂吸附法、雙水相萃、超濾膜法分離、超臨界CO₂流體萃取、高速逆流色譜法等，這些方法均存在一定缺點并且不利于工業化生產。其主要問題在于：工藝復雜、物耗過大、得率低，處理量不大。

發明內容

本發明的目的是提供一種制備高純度積雪草苷的方法。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：

1.一種制備高純度積雪草苷的方法之一，該方法是以積雪草為原料，用乙醇水溶液在超聲波條件下制備初提液，初提液經初步除雜、富集和重結晶得到高純度的積雪草苷；具體操作步驟如下：

1)制備積雪草粗提物

將積雪草粉碎，以5～15倍積雪草重量的質量濃度為75％乙醇水溶液浸泡，在50℃條件下超聲波提取4次，每次1小時，匯集4次提取液、過濾后將濾液減壓濃縮得到浸膏。

2)積雪草粗提取物的初步除雜

將步驟1)制得的浸膏溶于水，用浸膏水溶液等體積的石油醚萃取3次，匯集3次萃取液下相水溶液、再用下相水溶液等體積的乙酸乙酯萃取4次，匯集4次萃取液分相后下相水溶液，保留待用。

3)粗積雪草總苷制備

用與步驟2)得到的下相水溶液同等體積的正丁醇與乙酸乙酯體積比為1∶1的混合溶劑萃取3～6次，合并上相萃取液，用活性碳脫色萃取液，減壓濃縮脫色后的萃取液得粗積雪草總苷。

4)粗積雪草苷的純化

將步驟3)所得的粗積雪草總苷溶于甲醇，過濾，濾液濃縮后，再用質量濃度為90％乙醇水溶液溶解，在室溫條件下重結晶得到高純度的積雪草苷。

2.一種制備高純度積雪草苷的方法之二，該方法以積雪草為原料，用水溶液在超聲波條件下制備初提液，提取液經初步除雜、富集和重結晶得到高純度的積雪草苷；具體操作步驟如下：

1)制備積雪草粗提物

將積雪草粉碎，以5～15倍積雪草重量的水浸泡，在50℃條件下超聲波提取4次，每次1小時，匯集4次提取液、過濾，將濾液減壓濃縮得到浸膏。

2)除去多糖、葉綠素等

將步驟1)制得的浸膏用10倍浸膏重量的水溶解，再加入10～15倍浸膏重量的無水乙醇，產生沉淀，將產生沉淀過濾，濾液濃縮得浸膏。

3)除去溶于石油、乙酸乙酯的小極性物質

將步驟2)制得的浸膏溶于水，用浸膏水溶液等體積的石油醚萃取3次，匯集3次萃取液下相水溶液再用等體積的乙酸乙酯萃取4次，匯集4次萃取液分相后下相水溶液，保留待用。

4)粗積雪草總苷制備

用與步驟3)得到的下相水溶液同等體積的正丁醇與乙酸乙酯體積比為1∶1混合溶劑萃取3～6次，合并上相萃取液，用活性碳脫色萃取液，減壓濃縮脫色后的萃取液得粗積雪草總苷。

5)粗積雪草苷的純化

將步驟4)所得的粗積雪草總苷溶于甲醇，過濾，濾液濃縮，再用質量濃度為90％乙醇水溶液溶解后，在室溫條件下重結晶得到高純度的積雪草苷。

上述的一種制備高純度積雪草昔的方法之一中，步驟1)中，將積雪草粉碎，以10倍積雪草重量的質量濃度為75％乙醇水溶液浸泡，在50℃條件下超聲波提取4次，每次1小時。

上述的一種制備高純度積雪草苷的方法之二中，步驟1)中，將積雪草粉碎，以10倍積雪草重量的水浸泡，在50℃條件下超聲波提取4次，每次1小時。

上述的一種制備高純度積雪草苷的方法之一中，步驟3)中，用與步驟2)得到的下相水溶液同等體積的正丁醇與乙酸乙酯體積比為1∶1混合溶劑萃取4次。