[發明專利]家蠶性染色體連鎖基因PdpⅠ及其隱性致死突變基因和它們在家蠶性比控制中的應用

有效

• 申請號: 201110457127.2
• 申請日: 2011-12-31
• 公開（公告）號: CN102559691A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 牛寶龍;譚安江;孟智啟;黃勇平;翁宏飆;祝新榮;劉巖;何麗華;柳新菊
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/435;C12Q1/68;A01K67/04;C12N15/11
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司 33214
• 代理人: 王從友

1.家蠶性染色體連鎖基因PdpⅠ，其特征在于該基因具有Seq?ID?NO.1、Seq?ID?NO.3、Seq?ID?NO.5、Seq?ID?NO.7、Seq?ID?NO.9和Seq?ID?NO.11所示的mRNA序列。

2.權利要求1所述的mRNA序列編碼的蛋白質，其特征在于該蛋白質具有Seq?ID?NO.2、Seq?ID?NO.4、Seq?ID?NO.6、Seq?ID?NO.8、Seq?ID?NO.10和Seq?ID?NO.12所示的氨基酸序列。

3.家蠶性連鎖平衡致死系的致死基因，其特征在于該基因具有Seq?ID?NO.1、Seq?ID?NO.3、Seq?ID?NO.5、Seq?ID?NO.7、Seq?ID?NO.9和Seq?ID?NO.11所示的mRNA序列經過突變獲得的基因序列。

4.家蠶性連鎖平衡致死系的致死基因SLBL-l₁，其特征在于該基因具有Seq?ID?NO.13所示的DNA序列。

5.權利要求3或4所述的基因用于選育雄蠶。

6.分子標記法進行權利要求4所述的致死基因SLBL-l₁向常規品系轉育的方法，其特征在于該方法包括以下的步驟：

1）選擇家蠶性連鎖平衡致死系的雄蠶與常規品系的雌蠶雜交，F1代雌蠶全部死亡，雄蠶有兩種基因型全部存活，基因型為ZZ^l1或ZZ^l2，雄蠶飼養至蛾期，與常規品系的雌蠶進行單蛾雜交，雄蛾與卵圈一一對應，交配后的雄蛾提取基因組DNA，用特異性引物進行PCR檢測，選擇含有所述致死基因SLBL-l₁的雄蛾的后代F2代，基因型為ZZ^l1，繼續飼養，不含SLBL-l₁基因的卵圈棄去；

2）將F2代蠶飼養至蛾期，選擇雄蛾與常規品系的雌蠶進行單蛾雜交，交配后的雄蛾提取基因組DNA，進行PCR檢測，選擇含有所述致死基因SLBL-l₁的雄蛾的后代F3代，基因型為ZZ^l1，繼續飼養；如此反復多代雜交，就可將SLBL-l₁基因導入常規品系中。

7.根據權利要求6所述的分子標記法進行致死基因SLBL-l₁向常規品系轉育的方法，其特征在于其特征在于步驟1）和步驟2）中特異性的PCR引物如下：正向引物：5′-GTGTAGGATCACCGAGCAGTCAC-3′，反向引物：5′-GAGTGACCGACAGGAACGACCTG-3′；基因型為ZZ^?l1含有所述致死基因SLBL-l₁的雄蛾能夠擴增出2,940?bp片段。

8.用于鑒定權利要求4所述的致死基因SLBL-l₁的方法，其特征在于：該方法采用特異性的PCR引物，正向引物：5′-GTGTAGGATCACCGAGCAGTCAC-3′，反向引物：5′-GAGTGACCGACAGGAACGACCTG-3′，進行PCR檢測，能夠擴增出2,940?bp片段的為權利要求4所述的致死基因SLBL-l₁。

9.用于鑒定權利要求4所述的致死基因SLBL-l₁的特異性的PCR引物，其特征在于：該特異性的PCR引物由正向引物：5′-GTGTAGGATCACCGAGCAGTCAC-3′，反向引物：5′-GAGTGACCGACAGGAACGACCTG-3′組成。

10.權利要求9所述的特異性引物用于進行權利要求4所述的致死基因SLBL-l₁向常規品系的轉育及性比控制品種的分子鑒定。