[發明專利]利用IGY型鐵蛋白抗體、通過膠乳增強免疫比濁法測定血清中鐵蛋白的液體雙試劑試劑盒

有效

• 申請號: 201110454986.6
• 申請日: 2011-12-30
• 公開（公告）號: CN102628866A
• 公開（公告）日: 2012-08-08
• 發明（設計）人: 王恒強;高愛民;劉希
• 申請（專利權）人: 北京九強生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/564;G01N21/31
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

技術領域

本發明屬于醫學免疫體外診斷領域，涉及一種免疫檢測試劑，進一步地，本發明涉及一種利用IGY型鐵蛋白抗體、通過膠乳增強免疫比濁法測定血清中鐵蛋白的液體雙試劑試劑盒。?

背景技術

動植物體內廣泛存在一類貯存鐵的蛋白，在哺乳類動物的肝和脾中含量最多，其外徑約12～14nm，空囊腔徑長約6nm，外殼(即脫鐵鐵蛋白)由24個亞基組成，每個亞基約含163個氨基酸殘基，每個分子最多可結合4500個鐵原子。分子量約為900,000。結合鐵的鐵蛋白是“溶”于水的，血漿鐵蛋白的濃度與體內儲存的鐵成正比。?

鐵蛋白為機體內一種貯存鐵的可溶組織蛋白。正常人血清中含有少量鐵蛋白，但不同的檢測法有不同的正常值。一般正常均值男性約80-130μg/L(80-130ng/ml)女性約35-55μg/L(35-55ng/ml)。血清鐵水平在妊娠期及急性貧血時降低，急慢性肝臟損害和肝癌時升高，國內報道肝癌患者陽性率高達90％。近年來發現肝癌還含有一種酸性的異鐵蛋白，稱為癌胚異鐵蛋白，可能有助于早期診斷。肝癌患者有鐵蛋白增高的原因可能是：①肝癌細胞能合成和分泌鐵蛋白或異鐵蛋白；②肝癌組織對鐵蛋白的攝取及清除受到影響；③肝細胞損害壞死，貯存在肝細胞漿中的鐵蛋白溢入血中。血清鐵蛋白雖非特異性，但除肝癌、胰腺癌中度升高外，其它消化道腫瘤如食管癌、胃癌、直結腸癌均不升高。肝癌患者治療有效者血清鐵蛋白下降，而惡化和再發者升高，持續增高則預后不良，故血清鐵蛋白測定可作為療效監測手段之一，特別是對AFP陰性的患者尤有意義。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種鐵蛋白檢測試劑的改進，具有樣本(血清)無需稀釋、靈敏度高、特異性強、線性范圍寬、適用于各種類型的全自動生化分析儀的特點。?

一方面，本發明提供利用IGY型鐵蛋白抗體、通過膠乳增強免疫比濁法測定血清中鐵蛋白的液體雙試劑試劑盒，該試劑盒包括試劑R1、試劑R2和已知濃度的鐵蛋白抗原校準品，其中，?

試劑R1包含高分子加速劑、防腐劑、表面活性劑、電解質及緩沖液；試劑R2包含結合抗人鐵蛋白抗體的聚苯乙烯膠乳顆粒，膠乳顆粒直徑為100-200nm，還包含防腐劑、表面活性劑、電解質及緩沖液；已知濃度的鐵蛋白抗原標準品包含防腐劑、純化人鐵蛋白、電解質及緩沖液。?

更進一步地，在本發明的一實施方案中，利用IGY型鐵蛋白抗體、通過膠乳增強免疫比濁法測定血清中鐵蛋白的液體雙試劑試劑盒包括：試劑R1、試劑R2和已知濃度的鐵蛋白抗原校準品。其中：?

所述試劑R1中高分子加速劑的質量百分比為2％-6％，防腐劑的質量百分比為0.05％-0.5％，表面活性劑的質量百分比為0.1％-1.0％，電解質的質量百分比為0.1％-10.0％，緩沖液的濃度為10mmol/L-200mmol/L。?

所述試劑R2中膠乳顆粒的含量百分比為0.05％-0.5％，IGY型鐵蛋白多克隆抗體的含量為0.05mg/mL-0.5mg/mL，防腐劑的質量百分比為0.05％-0.5％，表面活性劑的質量百分比為0.1％-1.0％，電解質的質量百分比為0.1％-10.0％，緩沖液的濃度為10mmol/L-200mmol/L。?

已知濃度的鐵蛋白抗原標準品，純化的鐵蛋白抗原的含量為100ng/mL-1000ng/mL，防腐劑的質量百分比為0.05％-0.5％，電解質的質量百分比為0.1％-10.0％，緩沖液的濃度為10mmol/L-200mmol/L。?

在本發明所述利用IGY型鐵蛋白抗體、通過膠乳增強免疫比濁法測定血清中鐵蛋白的液體雙試劑試劑盒中，所述的IGY型鐵蛋白抗體來自雞或鴨，優選為來自于雞。此多克隆抗體可特異地識別鐵蛋白多個抗原位點，因此能特異結合鐵蛋白單體和聚合體，同時也消除了傳統IGG型抗體中類風濕因子等因素對測值的影響。因此，該多克隆抗?體既可以保障抗原抗體的高效親和力，也保障了試劑盒的特異性，提高了抗干擾能力。?

本發明所述試劑R1、R2的緩沖液是三羥甲基氨基甲烷緩沖液或甘氨酸緩沖液，優選為三羥甲基氨基甲烷緩沖液。所述試劑R1、R2緩沖液的pH值為6.0-8.5，優選為7.0-8.0。?

本發明所述試劑中高分子加速劑選自PEG2000、PEG6000、PEG8000，優選為PEG6000。?

本發明所述試劑中防腐劑選自疊氮鈉或對羥基苯甲酸乙酯，優選為疊氮鈉。?

本發明所述試劑中表面活性劑選自Tween系列或聚氧乙烯苯基醚，優選為Tween。?