[發明專利]一種培育抗黃萎病棉花新品種的分子育種方法

有效

• 申請號: 201110450962.3
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102517396A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 張天真;王鵬;郭旺珍
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

1.一種利用海島棉染色體片段導入系培育抗黃萎病棉花新品種的分子育種方法，其特征在于包含如下步驟：

(1)以保藏號為CGMCC?NO.5574的海島棉染色體片段導入系IL095為母本，保藏號為CGMCC?NO.5575的海島棉染色體片段導入系IL154為父本，雜交1代，再自交1代獲得F₂，每代都是單株收獲；

(2)分子標記輔助第一次選擇：F₂種植，應用CTAB法提取DNA，采用所述的海島棉染色體片段導入系IL095對應的分子標記引物對NAU2626、NAU5061、NAU5024、BNL1026和所述的海島棉染色體片段導入系IL154對應的分子標記引物對BNL1034、NAU?1366、BNL3171進行PCR擴增，選擇同時含有上述7個來源于海島棉的分子標記條帶，分子量分別是215bp；340bp；400bp；300bp；220bp；230bp；700bp的單株自交獲得F₃，種子按單株收獲；其中分子標記引物對NAU2626正/反向序列為SEQ?ID?NO.3/SEQ?ID?NO.4，NAU5061正/反向序列為SEQ?ID?NO.7/SEQ?ID?NO.8，NAU5024正/反向序列為SEQ?ID?NO.5/SEQ?IDNO.6，BNL1026正/反向序列為SEQ?ID?NO.1/SEQ?ID?NO.2，BNL1034正/反向序列為SEQID?NO.9/SEQ?ID?NO.10，NAU1366正/反向序列為SEQ?ID?NO.13/SEQ?ID?NO.14，BNL3171正/反向序列為SEQ?ID?NO.11/SEQ?ID?NO.12；

(3)分子標記輔助第二次選擇：種植F₃，每株提取DNA后，再利用所述的分子標記引物對NAU2626、NAU5061、NAU5024、BNL1026、BNL1034、NAU?1366、BNL3171確定F₃單株的基因型，同時具有7個來源于上述海島棉的分子標記條帶，分子量分別是215bp；340bp；400bp；300bp；220bp；230bp；700bp的單株即為抗多個黃萎病菌種的育成品系。

2.根據權利要求1所述的一種利用海島棉染色體片段導入系培育抗黃萎病棉花新品種的分子育種方法，其特征在于所述的分子育種方法還包括步驟(4)：將步驟(3)篩選到的抗多個黃萎病菌種的F₃種植在溫室，利用致病力不同的黃萎病菌株進行抗病性篩選獲得抗多個黃萎病菌種的育成品系。