[發明專利]人干細胞生長因子脂質體及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201110449577.7
• 申請日: 2011-12-28
• 公開（公告）號: CN102512370A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 王一飛;陳海佳;舒輝萍;楊珂;劉薇;任哲
• 申請（專利權）人: 廣州賽萊拉生物科技有限公司
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K38/18;A61K8/64;A61P17/02;A61P17/10;A61Q1/04;A61Q1/08;A61Q1/12;A61Q9/02;A61Q15/00;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/10
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉

技術領域

本發明屬于藥物制劑及化妝品領域，特別涉及一種人干細胞生長因子脂質體及其制備方法與應用。

背景技術

人干細胞生長因子(human?stem?cell?growth?factor，hSCGF，又名LSLCL)是一種在骨髓造血微環境中起作用的早期造血刺激因子，具有多種生物學活性，主要分布于腦、肝臟、骨髓、胎盤、睪丸、腎臟等，由這些組織(尤其骨髓)中的基質細胞、成纖維細胞、內皮細胞、卵細胞、足細胞、肝細胞產生。其基因定位于人染色體19q13.3，由4個外顯子和3個內含子組裝成。已知人干細胞生長因子具有兩種形式，全長分子hSCGF-α(成熟mRNA完全開放讀碼框972bp，編碼323個氨基酸，表達蛋白大小約為45KDa)和在C端保守的Ca²⁺依賴糖識別結構域(calcium?dependent?carbohydrate?recognition?domain，CRD)內缺失78氨基酸(erythropoietin，Epo)、協同作用對紅細胞系有紅細胞爆發促進活性的的截短型分子hSCGF-β(成熟mRNA長738bp，編碼245個氨基酸)，因此屬于C型凝集素(C-type?lectin)超家族成員。

研究證實，SCGF在各種組織的損傷修復，傷口的愈合過程中有顯著的作用，SCGF可促進血管生成、創傷愈合。hSCGF-β在維持肥大細胞生理狀態下的存活中發揮作用，參與慢性炎癥時血管形成、纖維化、白細胞歸巢等病理過程；hSCGF-α通過促進肥大細胞增殖與活化，參與各種應急病理反應如超敏反應或急性炎癥反應，并促進組織纖維化的形成過程。在皮膚細胞衰老的過程中，SCGF可通過作用于真皮層的成纖維干細胞，使處于休眠、損傷的成纖維干細胞被激活和修復并成熟分化大量的成纖維細胞。

SCGF作為一種生物活性蛋白，具有常溫穩定性差、易降解、易失活；生物利用度低、半衰期短、代謝迅速等特點，在常規藥品制劑和化妝品劑型制備過程中存在劑型單一、穩定性差、生物利用度低等缺點。將其應用于化妝品中的關鍵問題是在制備化妝品過程中必須要保持SCGF的活性。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種人干細胞生長因子脂質體。

本發明的另一目的在于提供所述的人干細胞生長因子脂質體的制備方法。

本發明的再一目的在于提供所述的人干細胞生長因子脂質體的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：一種人干細胞生長因子脂質體，用作透皮藥物制劑，包含質量百分比2.0～4.0％的人干細胞生長因子、質量百分比8.0～10.0％的磷脂、質量百分比2.5～3.5％的膽固醇和質量百分比10～25％的保護劑。

所述的人干細胞生長因子可以用基因工程發方法制備的重組人干細胞生長因子，也可以是應用細胞培養液天然分離的人源人干細胞生長因子；

所述的人干細胞生長因子為hSCGF-α或hSCGF-β；

所述的磷脂為天然大豆磷脂、氫化磷脂、雙肉豆蔻磷脂酰膽堿(DMPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、二棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二硬脂酸磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二棕櫚酰磷脂酸(DPPA)或聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)；

所述的保護劑優選為抗壞血酸、維生素E、右旋糖苷、蔗糖、乳糖或海藻糖中的至少一種；

所述的人干細胞生長因子脂質體的平均粒徑為50～500nm；優選為50～200nm；

所述的人干細胞生長因子脂質體還包含助懸劑，助懸劑為高分子材料，如PVP等；

所述的人干細胞生長因子脂質體還包含甘露醇，在制備人干細胞生長因子脂質體凍干品時，甘露醇對人干細胞生長因子的活性提供有效保護；

所述的人干細胞生長因子脂質體的制備方法，優選包括以下步驟：

(1)用有機溶劑將磷脂和膽固醇溶解，在惰性氣體的保護下，于冰浴上超聲處理，得到超聲脂質體；

(2)在步驟(1)得到的超聲脂質體中加入有機溶劑，于35～45℃水浴中旋轉蒸發，除盡有機溶劑；再加入含有人干細胞生長因子和保護劑的磷酸鹽緩沖溶液，在惰性氣體保護下超聲處理；

(3)在步驟(2)得到的產物中加入甘露醇，抽真空冷凍干燥，使水分完全升華后用磷酸緩沖鹽溶液水化脂質，再加入水充分渦旋攪拌，擠出，得到人干細胞生長因子脂質體；