[發(fā)明專利]天門冬的組培繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110449408.3
• 申請(qǐng)日: 2011-12-29
• 公開（公告）號(hào): CN102487830A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何全慧;萬(wàn)聯(lián)新;楊再江;祝利;趙勇彪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶市秀山紅星中藥材開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.天門冬的組培繁殖方法，包括引種滅菌、組織誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)、分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)和生根培養(yǎng)，其特征在于具體步驟如下：

⑴引種滅菌：剪取天門冬春季嫩枝，放入洗潔精水溶液中浸泡5?分鐘，然后用自來(lái)水沖洗干凈；在超凈工作臺(tái)上再用75％酒精消毒10秒后，再用自來(lái)水沖洗干凈，然后切成含2個(gè)腋芽的l～2cm長(zhǎng)的莖段，再用0.1％升汞消毒3-5分鐘，最后用無(wú)菌水沖洗5次；然后取出，用無(wú)菌濾紙吸干水份，用刀切去傷口壞死部分；

⑵組織誘導(dǎo)：將消毒處理后的嫩枝接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，每瓶接種3枝，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，5-7天后可觀察到嫩枝切口處有少量愈傷組織開始萌動(dòng)，再過(guò)5-7天后可觀察到淡黃色致密的愈傷組織；

⑶繼代培養(yǎng)：將誘導(dǎo)產(chǎn)生的生長(zhǎng)狀態(tài)良好的淡黃色顆粒狀的愈傷組織接種于繼代培養(yǎng)基中，每瓶接種3枝，進(jìn)行繼代培養(yǎng)，第7-10天后可觀察到繼代培養(yǎng)基中又有新的愈傷組織產(chǎn)生；

⑷分化培養(yǎng)：將繼代增殖產(chǎn)生的淡黃色顆粒狀愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，每瓶接種3枝，進(jìn)行分化培養(yǎng)，7-10天后可觀察到愈傷組織開始生長(zhǎng)分化，顏色變綠，5-7天后能觀察到淡黃綠色不定芽，5-7天后出現(xiàn)叢生芽，平均每枝愈傷組織分化5個(gè)芽；

⑸壯苗培養(yǎng)：將分化培養(yǎng)的叢生芽轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，20-25天可觀察到叢生芽發(fā)育成了2.5-3.5cm的叢生苗；

⑹生根培養(yǎng)：將壯苗培養(yǎng)的叢生苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)生根，10-15天可觀察到苗根開始萌發(fā)，再過(guò)10-15天可觀察到81%的苗均生根，根須平均長(zhǎng)度3.1cm，每株苗平均生根3-4條；然后可出瓶煉苗，移栽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的天門冬的組培繁殖方法，其特征在于各發(fā)育生長(zhǎng)階段的培養(yǎng)條件是：人工氣候培養(yǎng)箱，光照周期起止時(shí)間是8:00-20:00，培養(yǎng)溫度是日溫25℃，夜溫18℃，培養(yǎng)濕度是50-60%，光照強(qiáng)度在組織誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)和分化培養(yǎng)階段是1000Lx-1600Lx，在壯苗培養(yǎng)和生根培養(yǎng)階段是1600Lx-2000Lx。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的天門冬的組培繁殖方法，其特征在于各發(fā)育生長(zhǎng)階段的基本培養(yǎng)基是：MS+3g/L蔗糖+7g/L瓊脂粉，PH值為5.8。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的天門冬的組培繁殖方法，其特征在于各發(fā)育生長(zhǎng)階段培養(yǎng)基的具體配方如下：

⑴誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L；

⑵繼代培養(yǎng)基：MS+6-BA1.0mg/L+IBA2.0mg/L；

⑶分化培養(yǎng)基：?MS+6-BA3.0mg/L+IAA4.5mg/L；

⑷壯苗培養(yǎng)基：?MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.5mg/L；

⑸生根培養(yǎng)基：?MS?+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L。