[發(fā)明專利]川丹參的組織培養(yǎng)快繁方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110449128.2
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102428875A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發(fā)明（設計）人: 張利;倪蘇;謝顯莉;王萌;鄒章滿;周永紅;楊瑞武;雷淑瓊
• 申請（專利權）人: 四川農業(yè)大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本發(fā)明采用的以嫩莖段為外植體的川丹參的組織培養(yǎng)快繁方法，步驟如下：

(1)、選擇外植體：選取川丹參1號帶頂芽和帶節(jié)的嫩莖段2～4cm為外植體；

(2)、消毒處理：將步驟1的嫩莖段經自來水沖洗、洗衣粉液清洗后，流水沖洗30min，超凈工作臺上用無菌水沖洗1～3次，75％酒精浸泡30s，無菌水沖洗2～4次，再用0.1％HgCl2并滴加3-5滴吐溫-80消毒5-7min，然后用無菌水沖洗5次以上；

(3)、誘導培養(yǎng)：從消毒后的材料上切取0.5～1.5cm帶頂芽或帶節(jié)的丹參嫩莖段接種到誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)小苗；所用培養(yǎng)基為MS+0.6mg/L6-BA+瓊脂+蔗糖，瓊脂濃度為8.0g/L，蔗糖濃度為30.0g/L；用1mol/L的HCl或NaOH調節(jié)pH為5.8～6.0；

(4)、增殖培養(yǎng)：將誘導培養(yǎng)基上產生的無根小苗，剪成1～3個節(jié)的切斷轉接到繼代增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所用增殖培養(yǎng)基為2/3MS+0.4mg/L6-BA+瓊脂+蔗糖，瓊脂濃度為6.0g/L，蔗糖濃度為27.0g/L；用1mol/L的HCl或NaOH調節(jié)pH為5.8～6.0；

(5)、生根培養(yǎng)：將繼代增殖培養(yǎng)基中長3～6cm的無根苗轉接到生根培養(yǎng)基上，其余小芽繼續(xù)培養(yǎng)；所用生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.5mg/LIBA+0.5mg/LNAA+瓊脂+蔗糖，瓊脂濃度為5.0g/L，蔗糖濃度為25.0g/L；用1mol/L的HCl或NaOH調節(jié)pH為5.8～6.0；以上誘導、增殖和生根培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22±1℃，光照強度14000lx～16000lx，光照時間不少于12h·d-1；

(6)、煉苗與移栽：無根苗在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，當根長到2～5cm時，拿到培養(yǎng)室外常溫下放置5～7天后打開瓶蓋煉苗3～5天；經消毒清洗后移植到腐殖土、蛭石和珍珠巖的混合基質中，并置于復有遮陽網的塑料拱棚中栽培至新芽伸長成活；所用腐殖土、蛭石和珍珠巖的混合基質配比為2∶1∶1。?