[發明專利]一種使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法

有效

• 申請號: 201110448728.7
• 申請日: 2011-12-28
• 公開（公告）號: CN103160544A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 趙云鵬;姜中人;李泓旻;王祉雯;陳柏庭
• 申請（專利權）人: 逢甲大學
• 主分類號: C12P7/02
• 分類號: C12P7/02;C12P7/40;C12P7/26;C12P19/12;C12P3/00;C12P5/00;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 北京中博世達專利商標代理有限公司 11274
• 代理人: 申健;王俊民

1.一種使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，包含下列步驟：

A.剔除一目標微生物中的一葡萄糖輸送酶基因序列；

B.引入一葡萄糖促進基因序列至該目標微生物中；

C.在該目標微生物的至少一五碳糖代謝基因序列上游引入至少一啟動子；以及

D.剔除該目標微生物中的至少一有機酸代謝基因序列。

2.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟A所述的該目標微生物可以是一大腸桿菌(Escherichia?coli)。

3.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟A所述的該葡萄糖輸送酶基因序列可以是一ptsG基因序列。

4.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟B所述的該葡萄糖促進基因序列可以是運動發酵單胞菌(Zymomonas?mobilis)的glf(glucosefacilitator?gene)基因序列。

5.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟C所述的該至少一五碳糖代謝基因可以是一rpiA、一tktA、一rpe、一talB、或其組合的基因序列。

6.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟D所述的該至少一有機酸代謝基因可以是一ldhA、一pta、一poxB、一frdA、或其組合的基因序列。

7.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟B可以是將該葡萄糖促進基因序列鑲嵌入該目標微生物的染色體上。

8.根據權利要求7所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，是該葡萄糖促進基因序列植入(incorporate)一個質體中，形成一第一重組型質體，再將該第一重組型質體轉形(transform)至該目標微生物中表現。

9.根據權利要求5所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，是將該大腸桿菌的該rpiA基因序列植入(incorporate)一個質體中，形成一第二重組型質體，再將該第二重組型質體轉形(transform)至該目標微生物中表現。

10.根據權利要求5所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，是將該大腸桿菌的該tktA基因序列植入(incorporate)一個質體中，形成一第三重組型質體，再將該第三重組型質體轉形(transform)至該目標微生物中表現。

11.根據權利要求5所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，是將該大腸桿菌的該rpe基因序列植入(incorporate)一個質體中，形成一第四重組型質體，再將該第四重組型質體轉形(transform)至該目標微生物中表現。

12.根據權利要求5所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，是將該大腸桿菌的該talB基因序列植入(incorporate)一個質體中，形成一第五重組型質體，再將該第五重組型質體轉形(transform)至該目標微生物中表現。

13.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，進一步包含以下步驟：

E.引入可產生一目標產物的基因序列至該目標微生物中，使該目標微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖以產生該目標產物。

14.根據權利要求13所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，該目標產物可以是醇類、有機酸、雙糖、氫氣、酮類、烷類、或其組合。

15.根據權利要求1所述的使微生物可同時發酵五碳糖與六碳糖的方法，其特征在于，步驟C所述的該至少一啟動子可以是一λP_RP_L啟動子。