[發(fā)明專利]人誘導(dǎo)性多能干細胞向角膜上皮樣細胞定向分化的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110448358.7 | 申請日： | 2011-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN103184187A | 公開（公告）日： | 2013-07-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 連祺周 | 申請（專利權(quán)）人： | 連祺周 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 362000 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 誘導(dǎo)性 多能 干細胞 角膜 上皮 細胞 定向 分化 方法 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種人誘導(dǎo)性多能干細胞向角膜上皮樣細胞定向分化的方法，其特征在于，包括步驟：
A、基于患者的眼表組織，分離人結(jié)膜基質(zhì)成纖維細胞和人結(jié)膜上皮細胞；
B、在所述成纖維細胞和人結(jié)膜上皮細胞導(dǎo)入基因Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4，產(chǎn)生誘導(dǎo)性多能干細胞iPSCs；
C、在所述iPSCs中加入IV型膠原、采用KSFM細胞培養(yǎng)基和SHEM細胞培養(yǎng)基輪流誘導(dǎo)的方法，對所述誘導(dǎo)性多能干細胞iPSCs向角膜上皮樣細胞定向分化。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟A具體包括：采用眼表組織來源的人結(jié)膜基質(zhì)成纖維細胞和人結(jié)膜上皮細胞進行誘導(dǎo)性多能干細胞系的建立；所述步驟B中，采用堿性磷酸酶染色、免疫熒光染色、畸胎瘤形成及基因芯片分析的方法進行誘導(dǎo)性多能干細胞系鑒定。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步驟C中，還進行角膜上皮樣細胞表型鑒定。
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