[發明專利]熱休克凋亡腦膠質瘤細胞的制備與檢測方法無效
| 申請號： | 201110448122.3 | 申請日： | 2011-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN102559598A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發明（設計）人： | 陸華 | 申請（專利權）人： | 陸華 |
| 主分類號： | C12N5/09 | 分類號： | C12N5/09;C12Q1/02;G01N15/10;G01N33/53;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 214000 江蘇省無*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 休克 凋亡腦 膠質 細胞 制備 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種熱休克凋亡腦膠質瘤細胞的制備與檢測方法，其應用于熱休克凋亡腦膠質瘤負載樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備工藝，所述制備工藝包括步驟：熱休克凋亡腦膠質瘤細胞的制備和檢測以及DC腫瘤疫苗的制備和檢測；其中，所述熱休克凋亡腦膠質瘤細胞的制備和檢測方法包括：
采用的人腦膠質瘤細胞株U251引自美國ATCC，按常規方法傳代培養；用RPMI1640培養基調整細胞濃度至106/ml，將細胞置于40℃，5％CO2培養箱中3h，取出細胞培養瓶，加入白樺酯酸至終濃度為10μg/ml，將細胞培養瓶移至37℃，5％CO2培養箱繼續培養誘導細胞凋亡；收獲凋亡細胞，加入無菌PBS洗滌4次，獲得凋亡腫瘤細胞抗原；
腫瘤細胞經40℃處理3h后用FITC-Annexin-V和PI雙標細胞后進行流式檢測計算凋亡率結果；
軟瓊脂克隆法檢測細胞抗原體外成瘤能力；以及
取制備抗原進行內毒素檢測。
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