[發(fā)明專利]奧硝唑注射液雜質(zhì)的檢測方法及含量測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110447117.0
• 申請日: 2011-12-28
• 公開（公告）號: CN102539564A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫毅;田阿娟;王婕
• 申請（專利權(quán)）人: 成都金典藥物科技開發(fā)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所 51124
• 代理人: 高蕓;武森濤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物分析領(lǐng)域，具體涉及奧硝唑注射液雜質(zhì)的檢測方法及含量測定方法。

背景技術(shù)

奧硝唑(Ornidazole)為第三代硝基咪唑類衍生物，用于治療厭氧菌和原蟲、滴蟲感染。其發(fā)揮抗微生物作用的機理可能是：通過其分子中的硝基，在無氧環(huán)境中還原成氨基或通過自由基的形成，與細胞成分相互作用，從而導致微生物死亡。奧硝唑的血漿消除半衰期為14小時，血漿蛋白結(jié)合率小于15％，廣泛分布于組織和體液中，包括腦脊液。奧硝唑在肝中代謝，在尿中主要以軛合物和代謝物排泄，小量在糞便中排泄。

奧硝唑中目前報道的雜質(zhì)共有3種，奧硝唑及其雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分別為：

奧硝唑：1-chloro-3-(2-methyl-5-nitro-1H-imidazol-1-yl)propan-2-ol，1-氯-3-(2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-1-基)丙-2-醇，化學式見式I。

雜質(zhì)1：2-methyl-5-nitro-1H-imidazole，2-甲基-5-硝基咪唑，化學式見式II。

雜質(zhì)2：1-(2-methyl-5-nitro-1H-imidazol-1-yl)propan-2-one，1-(3-氯-丙烯基)-2-甲基-5-硝基咪唑，化學式見式III。

雜質(zhì)3：1-(3-chloroallyl)-2-methyl-5-nitro-1H-imidazole，1-丙酮基-2-甲基-5-硝基咪唑，化學式見式IV。

式I?????????????????????????????????????????????????????式II

式III???????????????????????????????????????????????????式IV

發(fā)明人發(fā)現(xiàn)奧硝唑注射液中主要雜質(zhì)為2-甲基-5-硝基咪唑(即雜質(zhì)1)和1-(3-氯-丙烯基)-2-甲基-5-硝基咪唑(最大雜質(zhì)，即雜質(zhì)2)，2-甲基-5-硝基咪唑為合成過程中的中間體，分子式為C₄H₅N₃O₂；最大雜質(zhì)為奧硝唑降解產(chǎn)物，分子式為C₇H₈ClN₃O₂。為了更快速、精確檢測注射液中的雜質(zhì)，發(fā)明人提供了一種新的檢測方法檢測奧硝唑注射液中的雜質(zhì)2-甲基-5-硝基咪唑和1-(3-氯-丙烯基)-2-甲基-5-硝基咪唑，及其含量測定，以實現(xiàn)簡便、快速、精確控制產(chǎn)品質(zhì)量的目的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡便，迅速、精確的檢測方法，用于檢測奧硝唑注射液中的雜質(zhì)2-甲基-5-硝基咪唑(雜質(zhì)1)及其最大雜質(zhì)1-(3-氯-丙烯基)-2-甲基-5-硝基咪唑(雜質(zhì)2)。

本發(fā)明所述雜質(zhì)1為2-甲基-5-硝基咪唑，分子式為C₄H₅N₃O₂；所述雜質(zhì)2為最大雜質(zhì)1-(3-氯-丙烯基)-2-甲基-5-硝基咪唑，分子式為C₇H₈ClN₃O₂。

2-甲基-5-硝基咪唑(雜質(zhì)1)采用高效液相色譜檢測，HPLC檢測條件如下：

固定相：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

流動相：乙腈-水體積比為15-25∶75-85；或甲醇-水體積比為15-25∶75-85；乙腈-水或甲醇-水優(yōu)選體積比為20∶80；

流速：0.8-1.2ml/min(流速優(yōu)選1.0ml/min)；

柱溫：30-40℃(柱溫優(yōu)選35℃)；

檢測波長：305-315nm(310nm為優(yōu)選值)；

理論板數(shù)按奧硝唑峰計算應(yīng)不低于2500；

實驗材料的處理：

(1)供試品溶液的制備：取奧硝唑注射液1ml，加流動相定容至奧硝唑注射液的50-100倍體積量(優(yōu)選100倍)，搖勻，作為供試品溶液。

(2)對照品溶液的制備：

精密稱取2-甲基-5-硝基咪唑?qū)φ掌酚眉状既芙猓昧鲃酉嘞♂屩瞥?.0-3.0μg/ml(優(yōu)選2.5μg/ml)2-甲基-5-硝基咪唑的溶液，搖勻，作為2-甲基-5-硝基咪唑?qū)φ掌啡芤骸?!-- SIPO -->