[發明專利]一種凈化處理豆腐廢水微生物的分離方法

有效

• 申請號: 201110446946.7
• 申請日: 2011-12-28
• 公開（公告）號: CN102399695A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 周成;寧平;黃兆林;馬艷華
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12N1/02
• 分類號: C12N1/02;C02F3/34;C02F3/02;C02F103/32
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種凈化處理豆腐廢水微生物的分離方法，屬于應用微生物領域。

背景技術

豆腐在中國具有悠久的歷史，早在二千年前的西漢，豆腐加工工藝已經成熟。一般豆腐生產的主要原料是大豆。曬干后的大豆經篩選去除雜質后，用水浸泡、淘洗去除灰份，漂洗至潔凈，使其充分吸水膨脹，然后用打漿機磨碎，用水調成豆漿。豆漿蒸煮后，根據不同的產品，加人不同量的鹵水，攪拌均勻，壓濾脫水后，可制成各種豆腐制品。在豆腐生產的過程中，產生大量的廢水，豆腐廢水主要來源于水洗、浸泡和壓濾過程，另有部分沖洗水。這些廢水屬于高濃度有機廢水，在環境中發酵，發出刺鼻的惡臭。另外，長期以來我國的豆腐加工方式一直以作坊式的加工為主，其生產能力低下，設備簡陋、工藝原始、廠址分散。一般在城鎮四周，生產廢水進人地面水環境，引起附近水體的嚴重惡化。對于制豆腐廢水的處理一般采用以下幾種方法。

1）?采用物理化學為主的方法，例如：加藥絮凝，然后進行沉淀，或者進行氣浮，或者進行過濾。這些方法對濃度很高、生化性很好、溶解性污染物比例很高的有機廢水，處理效率低，運行費用高，污泥產生量大。

2）采用厭氧發酵進行處理。雖然處理效果很好，但是厭氧發酵的水力停留時間長，需要4天（施玉書，徐健，馬建萍?厭氧-好氧和生物凈化工藝處理豆制品廢水技術研究。中國沼氣，17(1):?34-36）。

3）?采用好氧發酵進行處理，此法的特點是水力停留時間短，處理周期短。但需要快速利用豆腐廢水微生物，高效利用豆腐廢水微生物能提高豆腐廢水的處理效果，加快處理進程縮短水力停留時間。

因此，對好氧發酵處理豆腐廢水而言，尋求快速分離獲得豆腐廢水凈化處理微生物的快速分離方法具有重要意義。

但目前對豆腐廢水的處理基本采用厭氧發酵（秦亞平等.豆腐生產廢不泊治理(I).?污染防治技術,1999,?12(2):?93-94;?張春楊等.豆腐廢水UASB?反應器中的原核生物多樣性及主要功能菌群.?微生物學報,?2004,44(2):?141-147）。豆腐廢水的好氧處理必須具有高效降解豆腐廢水的微生物。因此，獲得高效降解豆腐廢水微生物成為豆腐廢水快速好氧處理的前提。

發明內容

本發明涉及一種凈化處理豆腐廢水微生物的分離方法，為豆腐廢水的好氧發酵處理提供菌種保障。

本發明方法通過如下步驟進行：

1）選擇性培養基的制備

在400-600?g豆渣總添加700-900?ml豆腐廢水，攪拌，然后采用紗布過濾，收集濾液并加入2-4?g?大豆面，并定溶至1000ml，采用鹽酸和氫氧化鈉調節pH值至中性，用于固體和液體培養基的制作；制備液體培養基時，直接在121℃條件下滅菌20?min，備用；制備固體培養基時，在液體培養基中添加17-18?g/L瓊脂，溶解后在121℃條件下滅菌20?min，將滅菌后的培養基分裝制作平板培養基，備用；?

（2）初篩

將堆肥肥料或土壤用10倍稀釋法制備稀釋液，稀釋至10⁵-10⁷稀釋度，將10⁵-10⁷稀釋液分別涂布于平板培養基上，在20-35℃溫度下培養24-48?h，隨著培養時間的延長，會有不同的菌產生，在所有菌落中，隨機挑選菌落相對較大的菌株進行分離純化；

（3）復篩

將步驟（2）中分離純化的菌株分別接種于液體培養基中，在20-35℃、100?-160?rpm下搖床發酵1-3天，以每毫升發酵液中微生物數量大于10⁵個為選擇條件，篩選出快速生長繁殖的菌株，即單位體積發酵液中微生物數量最多的菌株，即得凈化處理豆腐廢水的微生物。

本發明中所述土壤來源于富含有機物、潮濕的土壤或豆腐廢水排放口周圍的土壤。

本發明中所述豆腐廢水為在制作豆腐制品過程中產生的廢水，包括水洗、浸泡、壓濾和沖洗過程中產生的廢水。

??本發明方法用于分離能快速處理豆腐廢水的微生物，為采用生物法處理豆腐廢水奠定基礎，本發明方法具有工藝簡單、操作方便、高效、選擇性好、成本低的優點。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步詳細說明，但本發明保護范圍不局限于所述內容。

實施例1：本凈化處理豆腐廢水微生物的分離方法，具體操作如下：

（1）選擇性培養基的制備