[發明專利]海星中提取的三種化合物在促進骨折愈合方面用途和制備方法

有效

• 申請號: 201110445378.9
• 申請日: 2011-12-28
• 公開（公告）號: CN102417509A
• 公開（公告）日: 2012-04-18
• 發明（設計）人: 張成海;周文波;李冬梅
• 申請（專利權）人: 大連美羅中藥廠有限公司
• 主分類號: C07D487/04
• 分類號: C07D487/04;C07D241/08;C07J9/00;A61K31/4985;A61K31/495;A61K31/575;A61P19/08
• 代理公司: 大連智慧專利事務所 21215
• 代理人: 周志艦

技術領域

本發明屬于中藥提取方法領域，特別涉及海星中的化合物的制備方法及其在促進骨折愈合方面的用途。

背景技術

近年來，有關海星活性成分及藥理活性的研究日益受到國內外的關注。迄今為止，各國研究人員已相繼從海星體內獲得了十幾類化學物質，其中包括皂苷、甾醇、生物堿、葸醌、多肽、氨基酸、多糖、脂類、蛋白質等化學成分。研究表明，海星提取物及其復方制劑具有抗癌、抗心律失常、降低血壓、促進學習記憶、抗菌抗病毒、溶血、抗疲勞等多種生物生理功能。用于治療急慢驚風、破傷風、癲癇、胃脘痛、反酸、腹瀉、治胃及十二指腸潰瘍、甲狀腺腫大、中耳炎等疾病。目前，尚無海星在治療跌打損傷藥物中應用的相關報道。但是海星具有很強的再生能力，它能很快在傷口處長出新的部分。海星的這種快速傷口修復的特性，應當在骨傷病愈合方面有顯著療效。

發明內容

本發明旨在提供海星中促進骨折愈合方面的化合物，為制備治療骨折方面的藥物提供原料。本發明的目的是提供三種活性化合物，即環（亮氨酸-脯氨酸）二肽（1）、環（絲氨酸—亮氨酸）二肽（2）和麥角甾-7，22-二烯-3β，5，6-三醇（3）的制備方法及其在促進骨折愈合方面的用途。三種活性化合物的結構式如下：?

?

本發明的化合物的提取方法如下：?

1、取海星藥材，粉碎，過80目篩。使用2-4倍量70-95%的乙醇提取加熱回流提取2-5次，每次時間為30-60分鐘，提取液合并后減壓濃縮，干燥，得總提取物。

提取的溶劑也可使用甲醇或丙酮

2、總提取物用水分散，依次用石油醚（30-60⁰C），乙酸乙酯，正丁醇等體積萃取3-5次，得正丁醇層和乙酸乙酯層。

3、乙酸乙酯層經硅膠柱分離，以三氯甲烷-丙酮（20:1）為洗脫劑，得到的餾分進一步利用制備薄層色譜，以石油醚-丙酮5:1為流動相，純化得到化合物3即麥角甾-7，22-二烯-3β，5，6-三醇；以三氯甲烷-丙酮（6:1）為流動相洗脫的餾分進一步利用制備薄層色譜分離和反相ODS柱以甲醇-水（65:35）純化，得到化合物1即環（亮氨酸-脯氨酸）二肽；

4、正丁醇層經硅膠柱分離，以三氯甲烷-甲醇（10:1）為流動相洗脫的餾分進行重結晶，并利用Sephadex?LH-20柱以甲醇洗脫，得到化合物2即環（絲氨酸—亮氨酸）二肽。

本發明中所述海星為以下三種海星：羅氏海盤車（Asterias?rollestoni?Bell?）（棘皮動物門海星綱鉗棘目海盤車科）、多棘海盤車（Asterias?amurensis?Lutken）（棘皮動物門海星綱鉗棘目海盤車科）、陶氏太陽海星（Solaster?dawsoni?Verrill）（別名太陽魚，棘皮動物門海星綱有棘目太陽海星科太陽海星屬）三種海星的一種或幾種，本發明的海星經炮制后，炮制的方法為取干海星，用流通蒸汽蒸2-4小時，然后置烘箱中，60℃-80℃?烘干，取出，放涼。

本發明海星提取化合物治療骨傷科疾病具有治療好、見效快、治愈率高等特點。并且藥源充足，制作方法簡單，成本低。

具體實施方式

以下實施例子進一步解釋本發明的內容，但并不用以限制本發明。

實施例1?

1、取羅氏海盤車藥材3.0公斤，用流通蒸汽蒸2-4小時，然后置烘箱中，60℃-80℃?烘干，取出，放涼，粉碎，過80目篩。使用3倍量85%的乙醇提取加熱回流提取3次，每次時間為30分鐘，提取液合并后減壓濃縮，干燥，得總提取物500克。

2、總提取物用水分散，依次用石油醚（30-60⁰C），乙酸乙酯，正丁醇等體積萃取3次，得正丁醇層85克和乙酸乙酯層18克。

3、乙酸乙酯層經硅膠柱分離，100-200目硅膠240克，以三氯甲烷-丙酮（20:1）為洗脫劑，得到的餾分進一步利用制備薄層色譜，以石油醚-丙酮5:1為流動相，純化得到化合物3即麥角甾-7，22-二烯-3β，5，6-三醇8mg；以三氯甲烷-丙酮（6:1）為流動相洗脫的餾分進一步利用制備薄層色譜分離和反相ODS柱以甲醇-水（65:35）純化，得到化合物1即環（亮氨酸-脯氨酸）二肽10mg；

4、正丁醇層經硅膠柱分離，100-200目硅膠240克，以三氯甲烷-甲醇（10:1）為流動相洗脫的餾分進行重結晶，并利用Sephadex?LH-20柱以甲醇洗脫，得到化合物2即環（絲氨酸—亮氨酸）二肽5mg。

實施例2?