[發明專利]丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒及其制備方法

有效

• 申請號: 201110444269.5
• 申請日: 2011-12-27
• 公開（公告）號: CN102525926A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 向雙林;曾佑林;張健;趙春艷;劉珊;劉美艷;蘇勝培;曾盈;胡翔
• 申請（專利權）人: 湖南師范大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K9/14;A61K47/18;A61K48/00
• 代理公司: 長沙永星專利商標事務所 43001
• 代理人: 周詠;林毓俊

技術領域

????本發明涉及一種丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒及其制備方法。

背景技術

????隨著生命科學技術的進步和生物工程的發展，核酸及核酸衍生物以其獨特的藥理作用而廣泛用于一些大疾病如癌癥、心血管病、白血病、艾滋病等的治療。核酸藥物治療的核心是將核酸藥物導入特定的細胞中，并能穩定地維持其功能，但由于細胞膜的阻隔，核酸藥物分子很難被直接轉移導入細胞。即使核酸藥物被轉移導入細胞，也存在病毒重組、致癌、免疫等多方面的問題，其安全性得不到保證；同時反義核酸、核酶、RNA干擾等核酸藥物易被體內核酸酶降解，造成藥物在體內不穩定，半衰期短。因此，發展新型、高效、安全的核酸藥物轉移載體成為核酸藥物治療的關鍵。

????目前，在基因治療中采用的載體有兩種類型：病毒載體和非病毒載體,其中病毒載體高效但易引起免疫反應，安全性較差，非病毒載體毒性低，效率相對較低，因而研究如何改善非病毒載體的效率已成為當今基因治療載體的研究方向。脂質體已成為研究最為廣泛的非病毒載體，其具有廣譜、毒性較低和效率較高等特。脂質體的化學結構、尺寸大小、電荷比等是影響其基因轉染效率的關鍵因素。

以環氧氯丙烷為原料，通過酸催化開環反應、叔胺反應、醚化和季銨鹽化反應，合成疏水鏈長度不同、親水端部不同和不同物理結構的丙二醇胺衍生物陽離子脂質，利用其帶正電荷的季銨鹽頭部可通過靜電作用結合核酸藥物，利用帶長鏈的疏水端可與細胞壁膦脂雙分子層結合的特征，可望通過融合內吞作用實現核酸藥物從胞外到胞內的轉運。

發明內容

本發明的目的在于是提供一種丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒及其制備方法，以期該丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒能夠實現核酸藥物從胞外到胞內的轉運。

????本發明所述的丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒，為碘化2,3-二烷氧基-1-(N,N,N-三甲基)丙銨或溴化2,3-二烷氧基-1-(N,N-二甲基-N-(2-羥乙基))丙銨，所述烷氧基為正辛基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基、正十八烷基。

????所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒的制備方法，包括如下步驟：

????(1)?以環氧氯丙烷為原料，以一水合對甲基苯磺酸為催化劑，水為溶劑及反應物，回流水解開環，經柱層析分離純化得到無色液體3-氯-1,2-丙二醇；

????(2)?在氫氧化鈉存在下，步驟(1)所獲得的無色液體3-氯-1,2-丙二醇與N,N-二甲胺鹽酸鹽進行叔胺化反應，經柱層析分離純化處理得到黃色液體3-(N,N-二甲基胺基)-1,2-丙二醇；

????(3)?以四氫呋喃為溶劑，以氫化鈉為催化劑，3-(N,N-二甲基胺基)-1,2-丙二醇與烷基溴回流反應，經柱層析分離純化處理得到2,3-二烷氧基-1-(N,N-二甲基)丙胺；

????(4)?步驟(3)得到的2,3-二烷氧基-1-(N,N-二甲基)丙胺與碘甲烷進行季銨鹽化反應，經乙酸乙酯重結晶純化處理得白色固體，經超聲波振蕩水分散后得到相應的丙二醇胺衍生物陽離子脂質體TMA-?Apd納米顆粒。

????所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質體納米顆粒的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟：

????(1)?以環氧氯丙烷為原料，以一水合對甲基苯磺酸為催化劑，水為溶劑及反應物，回流水解開環，經柱層析分離純化得到無色液體3-氯-1,2-丙二醇；

????(2)?在氫氧化鈉存在下，步驟(1)所獲得的無色液體3-氯-1,2-丙二醇與N,N-二甲胺鹽酸鹽進行叔胺化反應，經柱層析分離純化處理得到黃色液體3-(N,N-二甲基胺基)-1,2-丙二醇；

????(3)?以四氫呋喃為溶劑，以氫化鈉為催化劑，3-(N,N-二甲基胺基)-1,2-丙二醇與烷基溴回流反應，經柱層析分離純化處理得到2,3-二烷氧基-1-(N,N-二甲基)丙胺；