[發明專利]一種從石蒜屬植物中提取分離偽石蒜堿的方法

有效

• 申請號: 201110443976.2
• 申請日: 2011-12-27
• 公開（公告）號: CN102391266A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 黃玉君;劉濤;陳光強
• 申請（專利權）人: 貴州芊芊園藝新技術發展公司
• 主分類號: C07D471/06
• 分類號: C07D471/06;C07D491/107;C07D491/16
• 代理公司: 貴陽東圣專利商標事務有限公司 52002
• 代理人: 徐逸心

技術領域

本發明涉及從石蒜屬植物中提取分離偽石蒜堿的方法。?

背景技術

石蒜科（Amarylllidaceae）石蒜屬為我國和東亞一些國家的特有屬，其特征相對穩定，為多年生草本植物。石蒜科植物以其含有多種有生物活性和藥理活性的生物堿成分引起世界各國藥物研究人員的關注。石蒜屬植物很早被用作藥用，據《本草綱目》記載，石蒜屬植物具有解毒、怯痰、利尿、催吐功能。石蒜屬植物的化學成分主要包括生物堿和黃酮化合物方面。生物堿主要有石蒜堿、偽石蒜堿、高石蒜堿、石蒜倫堿、多花石蒜堿、加蘭他敏、力克拉敏、石蒜西定、小星蒜堿等。?

我國天然藥物研究人員從20世紀50年代開始石蒜生物堿的研究和藥物開發，氫溴酸加蘭他敏和二氫加蘭他敏（力克拉敏）已經用于臨床；1983年抗腫瘤新藥氧化石蒜堿通過臨床鑒定。進入21世紀，通過新的藥理篩選生物活性，發現了石蒜生物堿更多的藥理活性。?

偽石蒜堿最初是從石蒜科植物水仙及石蒜中提取的生物堿，其游離堿及鹽酸鹽在動物耐受量下，對大鼠W-256的生長有明顯的抑制作用。美國夏威夷大學的Furusawa等人于1971-1974年的藥理研究，證明了偽石蒜堿能延長患白血病脾腫大的大白鼠的壽命，抑制逆轉錄酶活性。?

偽石蒜堿（Pseudolycorine）又稱假石蒜堿，白色針狀晶體，熔點247～248℃，其鹽酸鹽為白色片狀晶體，熔點288℃，具有抗腫瘤和病毒作用，文獻資料記載偽石蒜堿提取分離資料較少，1978年第五期《中草藥通訊》（現名《中草藥》）有所報道，本發明是本公司科研人員經較長時間的研究的成果，與現有技術工藝和工藝條件完全不同。?

發明內容

本發明的目的，在于提供一種從石蒜屬植物鱗莖中分離偽石蒜堿的方法，達到工藝路線合理，有機溶劑用量最省，得到產品純度高，產品質量穩定的要求。?

本發明一種從石蒜屬植物中提取分離偽石蒜堿的方法，其特征是以石蒜屬植物鱗莖為原料，依次按以下步驟和工藝條件提取分離偽石蒜堿：?

（1）石蒜鱗莖干粉制作：將新鮮干凈石蒜鱗莖切片，曬干，粉碎，得石蒜鱗莖干粉；

（2）稀堿水拌濕：按50㎏石蒜鱗莖干粉加10㎏?1∶1（V/V）氨水混合拌勻，得弱堿性石蒜鱗莖粉；

（3）乙酸乙酯浸取：乙酸乙酯總用量為石蒜鱗莖干粉重量10倍，分三次回流提取，每次1.5h，合并三次回流提取液，得乙酸乙酯浸取液；

（4）蒸餾回收乙酸乙酯：蒸餾回收乙酸乙酯得乙酸乙酯浸膏；

（5）酸溶：每1㎏乙酸乙酯浸膏加5㎏稀硫酸溶解，稀硫酸濃度0.5％?V/V，過濾除雜后得酸性水溶液；

（6）氯仿萃取除雜：按上述酸性水溶液體積∶氯仿體積＝1∶1的比例用氯仿逆流萃取除雜，得氯仿除雜后的酸性水溶液，氯仿回收利用；

（7）調pH：用40-50%W/W濃度的NaOH溶液調節氯仿除雜后的酸性水溶液，使pH=10，得氯仿除雜后的堿性水溶液；

（8）鹽析除雜：在氯仿除雜后的堿性水溶液中加入氯化鈉，直到溶液飽和，攪拌均勻，離心過濾除去雜質，得鹽析液；

（9）乙酸乙酯萃取：按鹽析液體積∶乙酸乙酯體積＝1∶1.5-2的比例，用乙酸乙酯對鹽析液進行逆流萃取，得乙酸乙酯萃取液；

（10）蒸餾回收乙酸乙酯：蒸餾乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取膏；

（11）加水溶解：用蒸餾水溶解乙酸乙酯萃取膏，每1㎏乙酸乙酯萃取膏加蒸餾水5㎏，充分溶解，離心過濾，保留清液；

（12）柱層析：清液通過D201大孔吸附樹脂柱，然后先用2倍柱體積的蒸餾水洗脫，再用4倍柱體積的30％（V/V）甲醇水溶液洗脫，回收洗脫液，濃縮結晶，得偽石蒜堿粗品；

（13）重結晶：將偽石蒜堿粗品用50％（V/V）乙醇溶解，濃縮重結晶，得偽石蒜堿純品；

（14）真空干燥：重結晶所得偽石蒜堿純品于65℃真空干燥10小時，粉碎得純度為98.4％的偽石蒜堿。

其中步驟（2）稀堿水拌濕所用的稀堿液還包括用碳酸氫鈉或碳酸鈉的水溶液代替稀氨水溶液。

其中步驟（5）溶液所用的酸除硫酸外，還能用稀鹽酸。?

其中步驟（12）柱層析洗脫液可用乙醇水溶液代替甲醇水溶液。?

步驟（11）加水溶解后留下的不溶物殘渣可用于生產加蘭他敏和石蒜堿。?

本發明的創新點在于：（1）提供了一種綜合利用石蒜資源的方法；（2）提供了一種從石蒜屬植物鱗莖中分離偽石蒜堿的方法；（3）本發明結合逆流萃取、鹽析和大孔樹脂層析，工藝路徑合理，得到產品純度高，質量穩定。?