[發明專利]一種體外檢測日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮抗藥性的方法

無效

• 申請號: 201110441335.3
• 申請日: 2011-12-26
• 公開（公告）號: CN102520149A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 李洪軍;梁幼生;汪偉;曲國立;邢云天;戴建榮
• 申請（專利權）人: 江蘇省血吸蟲病防治研究所
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一種體外檢測日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮抗藥性的方法，其特征在于取一塊24孔細胞培養板，在板孔內加入濃度分別為10^-5、5×10^-6、10^-6及5×10^-7?mol/L吡喹酮藥液1?mL，隨后用接種環移入20~50條新逸出的日本血吸蟲尾蚴，在吡喹酮藥液作用20?min后在解剖鏡下觀察各孔內尾蚴斷尾變化，計算尾蚴斷尾率，實驗重復6次，通過觀察尾蚴斷尾率，檢測日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮的抗藥性。

2.根據權利權求1所述的體外檢測日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮抗藥性的方法，其特征在于尾蚴斷尾變化，是指在吡喹酮藥液作用后，日本血吸蟲尾蚴的體部和尾部分離斷開。

3.根據權利權求1所述的體外檢測日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮抗藥性的方法，其特征在于吡喹酮藥液為吡喹酮溶于1％二甲基亞砜DMSO中配制成濃度為1×10^-3?mol/L與水稀釋備用。

4.根據權利要求1、2或3所述的體外檢測日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮抗藥性的方法，其特征在于先在24孔細胞培養板孔內加入濃度分別為10^-5、5×10^-6、10^-6及5×10^-7?mol/L吡喹酮藥液各1mL，然后用接種環移入20～50條新逸出的日本血吸蟲尾蚴，在吡喹酮藥液作用20?min后，在解剖鏡下觀察各孔內尾蚴斷尾變化，計算尾蚴斷尾率，實驗重復6次，在經10^-5?mol/L吡喹酮藥液作用20?min后，尾蚴斷尾率<?40%；經5×10^-6?mol/L吡喹酮藥液作用20?min后，尾蚴斷尾率<?35%；經10^-6?mol/L吡喹酮藥液作用20?min后，尾蚴斷尾率<?30%；經5×10^-7?mol/L吡喹酮藥液作用20?min后，尾蚴斷尾率<?10%，即認為該日本血吸蟲尾蚴對吡喹酮具有抗藥性。