[發明專利]分離核酸的方法及裝置

有效

• 申請號: 201110436344.3
• 申請日: 2011-12-22
• 公開（公告）號: CN103173432B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 陳林;張冰;克勞斯.霍赫萊特納;侯嶸;王艷菊
• 申請（專利權）人: 通用電氣公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12M1/12
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 黃希貴

一種方法包括：將含有核酸的樣品溶液與石英纖維濾紙的樣品接收部接觸以使樣品溶液吸著至樣品接收部；使洗滌液在遠離樣品接收部方向的吸力作用下流過樣品接收部以在將大部分核酸保持在樣品接收部周圍的情況下洗滌樣品接收部。本發明還涉及相關的裝置。

技術領域

本發明涉及分離核酸的方法及裝置。

背景技術

核酸在如檢測或診斷等不同的領域有各種用途。在核酸水平檢測或診斷比例如在蛋白質水平更敏感或更具體。如植物或動物的組織粗提物、細胞裂解產物、或血液或尿液樣本等分析物包括除核酸以外的其他物質(或雜質)，其他物質的至少部分可能會抑制核酸檢測或屏蔽檢測結果，因此，通常有必要將核酸從雜質中分離出。包含核酸的分析物，通常可獲得的量較少，因此，人們開發了如聚合酶鏈反應(PCR)或逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)等擴增技術。有時，核酸分離的要求之一就是從分析物獲得足夠在隨后的擴增程序使用的核酸的數量。

現有各種不同隔離/分離/純化核酸的技術。例如，美國專利申請公開第2005/0112658號披露一種離心力下分離純化核酸的方法，美國專利申請公開第2007/0221563號公開一種壓力下分離純化核酸的方法，以及國際專利申請公開第2007/104962號涉及允許液體樣品沿吸水膜流動以使核酸沿著膜的長度分布從而從液體樣品中分離核酸的方法。

在如美國專利第7067287號等文獻有提及石英濾紙可作為離心力或壓力下回收核酸的方法中粘合核酸且包括粒子的固相。然而，目前還尚未發現石英纖維濾紙實際用于隔離/分離/凈化核酸，可能是由于其并不適合以顆粒形式使用，且其更多是在空氣采樣等與隔離/分離/凈化核酸大不相同的領域為人所熟知，也可能因為人們認為其結構過于緊密從而不能吸著核酸。

離心力和壓力需要產生力量和壓力的儀器以及特定的操作技能，因而對于如無法負擔得起昂貴的儀器和技術人員的地方是不理想的。此外，離心力和壓力可能會使核酸鏈斷裂分解，致使只能得到尺寸相對較小的核酸片段。沿膜分布以分離核酸有時可能引起對分離質量和提純效果的擔憂，因為核酸和雜質同時都在膜上擴散。

因此，有必要開發新的分離核酸的方法及裝置。

發明內容

本發明的目的是提供一種新的分離核酸的方法及裝置。

一方面，本發明涉及的方法包括：將含有核酸的樣品溶液與石英纖維濾紙的樣品接收部接觸以使樣品溶液吸著至樣品接收部；使洗滌液在遠離樣品接收部方向的吸力作用下流過樣品接收部以在將大部分核酸保持在樣品接收部周圍的情況下洗滌樣品接收部。

另一方面，本發明涉及的裝置包括：石英纖維濾紙，其包括：樣品接收部，其與含有核酸的樣品溶液接觸以吸著樣品溶液，并在洗滌液在遠離樣品接收部的吸力作用下流過的時候將大部分核酸保持在周圍。

本發明所涉及的分離核酸的方法及裝置解決了現有技術的技術問題。

附圖說明

通過結合附圖對于本發明的實施例進行描述，可以更好地理解本發明，在附圖中：

圖1是根據本發明的第一實施例所提供的裝置的示意圖。

圖2是根據本發明的第二實施例所提供的裝置的示意圖。

圖3是根據本發明的第三實施例所提供的裝置的示意圖。

圖4是例1中獲得的電泳圖像。

圖5為例2中截取用于電泳的小片的示意圖。

圖6為例2和對比例1中獲得的電泳圖像。

圖7為例5中洗滌步驟的示意圖。

具體實施方式