[發明專利]LECT2蛋白及LECT2蛋白變體在制藥中應用

無效

• 申請號: 201110434051.1
• 申請日: 2011-12-22
• 公開（公告）號: CN102552882A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 陳炯;陸新江;史雨紅;章瑞程;呂技能;虞朝暉;裘芳
• 申請（專利權）人: 寧波大學;浙江大學醫學院附屬第一醫院;杭州永能生物科技有限公司
• 主分類號: A61K38/19
• 分類號: A61K38/19;A61P37/04;A61P31/04
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

技術領域

本發明涉及LECT2蛋白的應用，具體涉及LECT2蛋白及LECT2蛋白變體在制藥中應用。

背景技術

白細胞衍生趨化因子(leukocyte?cell-derived?chemotaxin?2，LECT2蛋白)是一個多功能的蛋白質，分子量約為16?kDa，含三個分子內二硫鍵，該分子結構簡單，無糖基修飾。LECT2一開始被認為是一種嗜中性粒細胞趨化因子，隨著研究的深入，人們發現它還與骨骼和血管生長、肝移植損傷修復、植物毒素、非病原抗原等引起的病理和生理過程有關，如公布號為CN102159238，名稱為抑制病理性血管發生作用的組合物，就公開了包括有效量的LECT2蛋白或其類似物（LECT2蛋白變體）制備成抑制病理性血管發生作用和/或細胞增生性疾病的組合物。但是目前尚未有發現LECT2對巨噬細胞活性的影響以及對細菌性敗血癥的預防和治療作用。

細菌性敗血癥是一種由細菌感染（革蘭氏陰性或革蘭氏陽性細菌）引起，產生強烈全身性炎癥反應的疾病，引發或自發凝血、嚴重低血壓、多器官衰竭、休克并最終導致死亡；通常諸如肺炎、外傷、外科手術和燒傷等事件或由諸如癌癥或AIDS等病癥會并發細菌性敗血癥。治療細菌性敗血癥的已知方法包括抗菌劑、抗體、小分子多肽、蛋白質C、靜脈輸液和可提高血壓的藥物，如美國專利申請案第20030008822號中揭示使用抗IL-18抗體來治療細菌性敗血癥。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供LECT2蛋白及LECT2蛋白變體在制藥中應用；LECT2蛋白及LECT2蛋白變體可誘導巨噬細胞活性變化，導致巨噬細胞吞噬能力增強，對預防和治療細菌性敗血癥有效。

本發明的上述技術問題所采用的技術方案為：LECT2蛋白及LECT2蛋白變體在制藥中應用，具體是在制備提高巨噬細胞的吞噬能力和/或預防和治療細菌性敗血癥藥物中的應用。所述LECT2蛋白變體為所述LECT2蛋白的氨基酸序列修飾產物，包括改變、置換、取代、插入或缺失編碼序列中的一個氨基酸或復數個氨基酸獲得，所述LECT2蛋白變體至少有60%氨基酸序列與LECT2蛋白的基酸序列相同。

所述LECT2蛋白為重組LECT2蛋白；重組LECT2蛋白的制備可以依據Ovejero等公開的?“Identification?of?the?leukocyte?cell-derived?chemotaxin?2?as?a?direct?target?gene?of?beta-catenin?in?the?liver”(?Hepatology,?2004年7月、40(1),?167-176?)方法進行制備，在此不作敘述。

LECT2蛋白、LECT2蛋白變體可在哺乳動物中提取，可以依據可以依據Yamagoe等公開的?“Purification?and?primary?amino?acid?sequence?of?a?novel?neutrophil?chemotactic?factor?LECT2”(?Immunol?Lett,?1996年8月、52(1),?9-13)?方法進行提取，或者在動物細胞、低等真核生物或原核生物中重組表達。如包括猴COS細胞、CHO細胞、人類腎臟293細胞、人類表皮A431細胞、人類Colo205細胞、3T3細胞、CV-1細胞、其它經轉化的靈長類細胞、正常的二倍體細胞、由體外培養的原生組織衍生的細胞株、原生移植體、Hela細胞、老鼠L細胞、BHK、HL-60、U937、HaK或Jurkat細胞等動物細胞中提取。可在包括粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces?pombe）、克魯維酵母菌株（Kluyveromyces?strains）、念球菌屬（Candida）或任何可表達異源性蛋白的酵母菌中表達得到重組LECT2蛋白。或在包括大腸桿菌（Escherichia?coli）、枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）、鼠傷寒沙門氏菌或細菌等原核生物進行表達得到重組LECT2蛋白；LECT2蛋白或重組LECT2蛋白進一步可修飾為LECT2蛋白變體或重組LECT2蛋白變體，例如于適當的位置進行磷酸化或糖基化，仍具有提高巨噬細胞的吞噬能力和預防和治療細菌性敗血癥的功能。