[發明專利]鹽芥ThPER32基因的應用

有效

• 申請號: 201110430664.8
• 申請日: 2011-12-20
• 公開（公告）號: CN102517324A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 周宜君;高飛;張根發;馮金朝;韋善君;徐小靜;程文靜;耿玉珂;馬亭亭
• 申請（專利權）人: 中央民族大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/84;A01H5/00;C12N15/53;C12N9/08;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及生物技術領域中鹽芥ThPER32基因的應用。

背景技術

鹽生植物鹽芥為十字花科(Brassicaceae)、鹽芥屬(Thellungiella)植物，生于土壤鹽漬化的農田旁、水溝邊和山區，分布于蒙古、西伯利亞和北美，在我國主要分布于山東、河北、江蘇、新疆、內蒙古、吉林、天津和河南等地。

在鹽漬環境下生長的鹽芥，不僅具有作為模式生物的基本特征，而且與擬南芥近緣。由于擬南芥作為模式植物，其許多方面研究已十分清楚，為進行鹽芥基因水平上的研究提供了有利條件。已有的研究結果表明，鹽芥在響應非生物脅迫中有許多基因所編碼的蛋白質的功能未知，對未來的遺傳學研究來說，它是一種具有豐富遺傳資源的植物。因此，作為一種具有應用前景的植物耐鹽模式系統，鹽芥現已被國際、國內許多實驗室采納用于植物抗逆生理生化和分子機制的研究。

植物受到環境脅迫(如高鹽、低溫等)，體內存在著活性氧(Reactive?Oxygen?Species，ROS)平衡體系就會受到破壞。活性氧的積累，對活性氧敏感的磷脂膜及脂肪酸首先受損，導致生物膜中脂質的過氧化，干擾鑲嵌于生物膜系統上的多種酶的空間構型，導致膜的孔隙變大、通透性增加、代謝紊亂，使植物受到傷害，生長抑制，衰老和加速死亡。在長期適應進化中，植物體內形成了一套有效的ROS清除機制，分為酶促和非酶促兩類。其中酶促保護系統主要有超氧化物歧化酶(Superoxide?Dismutase，SOD)、過氧化氫酶(Catalase，CAT)、抗壞血酸過氧化物酶(Ascorbate?Peroxidase，APX)、過氧化物酶(Peroxidase，POD)和谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione?Peroxidase，GPX)等。

高等植物中過氧化物酶Class?III(POD)屬于大家族，在水稻中有138個成員，在擬南芥中有73個成員，在應答內部和外部各種脅迫中，各成員各自表達發揮特殊的作用，其中有部分編碼POD的基因在正常條件和高鹽脅迫下表達豐度較高，而且在NCBI中登錄的鹽芥的ESTs文庫中也檢索到相關編碼POD基因。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種培育轉基因植物的方法。

本發明所提供的培育轉基因植物的方法，是將序列表中序列2所示蛋白的編碼基因轉入出發植物中，得到耐逆性高于所述出發植物的轉基因植物。

上述方法中，所述蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1；

2)其編碼序列是序列表中序列1自5’末端起第53-1114位核苷酸所示；

3)在嚴格條件下與1)或2)的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；

4)與1)或2)或3)的基因具有90％以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。

上述任一所述方法中，所述耐逆性為耐鹽性和/或耐旱性。

上述任一所述方法中，所述蛋白的編碼基因是通過重組表達載體導入出發植物中；所述重組表達載體為在載體pPZP212的多克隆位點間插入所述蛋白的編碼基因得到的重組表達載體。

上述任一所述方法中，所述目的植物為雙子葉植物或單子葉植物；所述雙子葉植物具體為煙草、鹽芥或擬南芥。

含有序列表中序列2所示蛋白的編碼基因的表達盒、重組載體、轉基因細胞系或重組菌也屬于本發明的保護范圍。

所述重組載體為在載體pPZP212的多克隆位點間插入序列表中序列2所示蛋白的編碼基因得到的重組表達載體。

所述蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1；

2)其編碼序列是序列表中序列1第53-1114位所示；

3)在嚴格條件下與1)或2)的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；

4)與1)或2)或3)的基因具有90％以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。

序列表中序列2所示蛋白的編碼基因和/或上述表達盒、重組載體、轉基因細胞系或重組菌在培育耐逆植物中的應用也屬于本發明的保護范圍。

上述應用中，所述耐逆植物為耐鹽和/或耐旱植物；

上述應用中，所述蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1；

2)其編碼序列是序列表中序列1第53-1114位所示；