[發(fā)明專利]同時(shí)測(cè)定功能性食品中多黃酮類功效成分的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110429170.8
• 申請(qǐng)日: 2011-12-20
• 公開（公告）號(hào): CN103175903A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙曉娟;李星芝;王俊全;童艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津天獅生物發(fā)展有限公司;天獅集團(tuán)有限公司;天津天獅生命源有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 陸藝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及同時(shí)測(cè)定功能性食品中多黃酮類功效成分的方法。

技術(shù)背景

改革開放以來(lái)，功能性食品行業(yè)作為21世紀(jì)的朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)愈來(lái)愈呈現(xiàn)出勃勃生機(jī)，功能性食品也逐漸走進(jìn)了廣大人民群眾的生活，對(duì)促進(jìn)機(jī)體健康、突破亞健康、祛除疾病等方面發(fā)揮了重要作用。

大豆苷元，又稱大豆甙元，本品為黃色或淡黃色粉狀、味微苦。主要成分：大豆異黃酮，主要用途：用于治療婦女更年期綜合癥、前列腺癌、乳腺癌、心臟病、心血管病、骨質(zhì)疏松。用于保健類食品及藥品添加，用于治療婦女更年期綜合癥、前列腺癌、乳腺癌、心臟病、心血管病、骨質(zhì)疏松。

染料木素別名染料木黃酮，金雀異黃酮，化學(xué)名5，7-二羥基-3-(4-羥苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮；4’，5，7-三羥基異黃酮。來(lái)源為豆科植物金雀花，廣豆根。其藥理藥效具有雌性激素及抗雌激素性質(zhì)，具有抗氧化作用，可以抑制酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性，可以抑制拓?fù)洚愘?gòu)酶II的活性，具有誘發(fā)細(xì)胞程序性死亡、提高抗癌藥效、抑制血管生成等作用，是一種很有潛力的癌癥化學(xué)預(yù)防劑，其抗癌作用及機(jī)制具有廣泛的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了提供一種同時(shí)測(cè)定功能性食品中多黃酮類功效成分的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：

一種同時(shí)測(cè)定功能性食品中多黃酮類功效成分的方法，包括如下步驟：

(1)精確稱取原料0.1g置于25mL容量瓶中，加入甲醇20mL，超聲處理30min，冷卻至室溫，以甲醇定容至刻度，搖勻后過0.45μm濾膜，濾液供高效液相色譜儀測(cè)定；

(2)精確稱取大豆苷元和染料木素標(biāo)準(zhǔn)品各10mg，置于10mL容量瓶中，用色譜純甲醇超聲溶解，定容至刻度，為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；將所述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋配成1.0mg/mL，2.0mg/mL，5.0mg/mL和10.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別注入高效液相色譜儀測(cè)定，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中大豆苷元、染料木素濃度；

HPLC測(cè)定條件：

色譜柱：C18，150mm×2.1mm，3.5μm；

流動(dòng)相條件：

a)乙腈與質(zhì)量濃度為0.4％的磷酸水溶液的比值為＝40％∶60％，檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm；進(jìn)樣量：5μL；

b)柱溫：35℃；

c)流速：1.0mL/min。

本發(fā)明的有益效果是：采用同一流動(dòng)相同時(shí)測(cè)定大豆苷元、染料木素，避免了兩種物質(zhì)分別測(cè)定造成的資源浪費(fèi)，該發(fā)明的前處理過程簡(jiǎn)單、操作方便，方法重現(xiàn)性好，靈敏度高。

附圖說明

圖1為大豆苷元(第一峰)、染料木素(第二峰)標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜質(zhì)譜圖。

圖2為樣品液相色譜質(zhì)譜圖。

具體實(shí)施方式

下面通過實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，這些描述并不是對(duì)本發(fā)明內(nèi)容進(jìn)一步的限定。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)理解，對(duì)本發(fā)明內(nèi)容所做的等同替換或相應(yīng)的改進(jìn)，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1

一種同時(shí)測(cè)定功能性食品中多黃酮類功效成分的方法，包括如下步驟：

(1)精確稱取原料骨寶片0.1g置于25mL容量瓶中，加入甲醇20mL，超聲處理30min，冷卻至室溫，以甲醇定容至刻度，搖勻后過0.45μm濾膜，濾液供高效液相色譜儀測(cè)定；

(2)精確稱取大豆苷元和染料木素標(biāo)準(zhǔn)品各10mg，置于10mL容量瓶中，用色譜純甲醇超聲溶解，定容至刻度，為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；將所述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋配成1.0mg/mL，2.0mg/mL，5.0mg/mL和10.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別注入高效液相色譜儀測(cè)定，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(3)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中大豆苷元、染料木素濃度；

HPLC測(cè)定條件：

色譜柱：C18，150mm×2.1mm，3.5μm；

流動(dòng)相條件：

a)乙腈與質(zhì)量濃度為0.4％的磷酸水溶液的比值為＝40％∶60％，檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm；進(jìn)樣量：5μL；

b)柱溫：35℃；

c)流速：1.0mL/min。

見圖1和圖2。