[發(fā)明專利]阻斷HIV病毒復(fù)制及向宿主細(xì)胞DNA整合的復(fù)合生物制劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110427788.0
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN103159836A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李磊;李丹;錢斌
• 申請（專利權(quán)）人: 上海漢明波生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C12N15/11;A61K38/16;A61K48/00;A61P31/18
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)以及醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域；更具體地，本發(fā)明涉及阻斷HIV病毒復(fù)制及向宿主細(xì)胞DNA整合的新型復(fù)合生物制劑。

背景技術(shù)

艾滋病，又稱獲得性免疫缺陷綜合癥(Acquired?Immune?Deficiency?Syndrome，AIDS)，是由人免疫缺陷病毒(Human?Immunodeficiency?Virus，HIV)引起的一種病死率達(dá)100％的傳染性疾病，于1981年在美國首先被確認(rèn)。在過去的30年中，全球至少已有2500萬人死于該傳染病，此外艾滋病的感染者超過6000萬人。據(jù)國家衛(wèi)生部最新公布的數(shù)據(jù)，我國艾滋病毒感染者約為42.9萬人，其中艾滋病發(fā)病者超過16萬人。盡管近年來有關(guān)艾滋病的研究已有長足的進(jìn)步，特別在艾滋病傳播途徑和預(yù)防方法方面取得了較大的進(jìn)展，全球艾滋病發(fā)病率呈下降趨勢，但對于艾滋病病人，特別是艾滋病發(fā)病的受試者的臨床治療仍缺乏根本性的治療方法和藥物。直至今日，由于HIV病毒存在的高度變異性，科學(xué)家仍未研制出切實(shí)有效的艾滋病疫苗，針對HIV的系列拮抗制劑也不能真正對病毒進(jìn)行有效的殺滅作用。2010年7月在奧地利維也納召開的第18屆世界艾滋病大會上，與會代表一致認(rèn)為盡管全球艾滋病形勢繼續(xù)惡化的總勢頭正在得到抑制，但人類最終戰(zhàn)勝艾滋病仍需付出巨大努力，并呼吁急需增加投入，以繼續(xù)與艾滋病作斗爭。

已研究證實(shí)，HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒，可通過直接和間接作用，致使人CD4+T淋巴細(xì)胞功能受損和大量破壞，導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫缺陷。CD4+T淋巴細(xì)胞受損方式主要包括：

(1)病毒直接損傷：HIV感染宿主免疫細(xì)胞后以每天產(chǎn)生10⁹～10¹⁰顆粒的速度繁殖，并直接使CD4+T細(xì)胞溶解破壞。病毒復(fù)制產(chǎn)生的中間產(chǎn)物及gp?120、vpr等可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

(2)非感染細(xì)胞受累：感染HIV的CD4+T細(xì)胞表面gp120表達(dá)，與未感染的CD4+T細(xì)胞的CD4分子結(jié)合，形成融合細(xì)胞使膜通透性改變，細(xì)胞溶解破壞。

(3)免疫損傷：gp120與未感染HIV的CD4+T細(xì)胞結(jié)合成為靶細(xì)胞，被CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用及抗體依賴性細(xì)胞毒(ADCC)作用攻擊而破壞，致CD4+T細(xì)胞減少。

(4)來源減少：HIV可感染骨髓干細(xì)胞，使CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生減少。HIV外膜蛋白gp120可抑制原始T淋巴細(xì)胞向CD4+T細(xì)胞轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致CD4+T細(xì)胞減少。表現(xiàn)為對可溶性抗原識別缺陷，細(xì)胞因子產(chǎn)生減少，B細(xì)胞輔助能力降低，并可喪失遲發(fā)型免疫反應(yīng)等。

HIV病毒感染宿主的過程主要分以下幾個階段：[1]病毒外殼蛋白gp120與人體淋巴細(xì)胞CD4-CCR5的結(jié)合，進(jìn)而與宿主細(xì)胞融合；[2]通過融合進(jìn)入宿主細(xì)胞后，HIV病毒經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成為DNA；[3]非整合的線性DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞核與宿主DNA發(fā)生整合；[4]整合后的DNA再以mRNA方式重新進(jìn)入宿主細(xì)胞胞漿；[5]在宿主細(xì)胞漿內(nèi)重新合成組裝成新的HIV病毒；[6]HIV病毒成熟后自宿主細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)釋放，成熟的病毒顆粒再感染新的細(xì)胞。

圍繞上述HIV感染周期，人們已研制了大量的抗艾滋病藥物，截至目前為止，美國食品藥品管理局(FDA)，已批準(zhǔn)進(jìn)入臨床應(yīng)用的藥物包括核轉(zhuǎn)錄蛋白酶抑制劑、非核轉(zhuǎn)錄蛋白酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、病毒整合酶抑制劑、病毒融合抑制劑，以及抑制病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞等六大類，共30種藥物。盡管上述藥物對抑制艾滋病的發(fā)生和發(fā)展具有較好的效果，可延緩HIV病毒攜帶者發(fā)展成為艾滋病病人的周期，但仍然無法從根本上消除攜帶者體內(nèi)的HIV病毒，對于已經(jīng)發(fā)展成為艾滋病的病人無任何明顯療效。迄今為止，HAART(高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療，Highly?Active?Anti-Retroviral?Therapy)，也即是所謂的雞尾酒療法是目前公認(rèn)的抗艾滋病一線藥物，盡管HAART可延長HIV感染者的生命周期，但對艾滋病病人的病死率的降低仍無有效作用，且受試者需終身服藥，一旦停用，2周內(nèi)病情勢必反彈，此外，高昂的價格和明顯的藥物毒副作用仍然是其難以回避的問題。

鑒于以上本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)缺陷，研制真正能對艾滋病病人具有根本性治療效果的藥物，乃是當(dāng)前急需解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種涉及阻斷HIV病毒復(fù)制及向宿主細(xì)胞DNA整合的新型復(fù)合生物制劑。

本發(fā)明的另一目的在于提供所述符合生物制劑的制備方法和用途。

在本發(fā)明的第一方面，提供一種分離的多肽，所述的多肽是：