[發明專利]一株飼用枯草芽孢桿菌的高密度生產工藝及其制備的菌劑和應用

無效

• 申請號: 201110427763.0
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN102433283A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發明（設計）人: 周映華;劉惠知;吳勝蓮;曾艷;胡新旭;高書鋒;汪彬;周小玲;繆東
• 申請（專利權）人: 湖南省微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/02;A23K1/16;A61K35/74;A61P31/04;C12R1/125
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所 43114
• 代理人: 袁靖

1.一株飼用枯草芽孢桿菌的高密度生產工藝，所述的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)的保藏編號為ACCC10619；其特征在于，包括以下步驟：

1)將經過斜面活化的菌株進行種子搖瓶培養，然后進行搖瓶發酵培養；所述搖瓶發酵培養條件為：接種量為培養基體積的1～5％，500ml搖瓶中培養基的裝量為50～200ml；發酵溫度28～34℃，pH值6.8～7.5，搖床轉數180～250rpm，培養18～24h；所述發酵培養基由如下質量組分組成：葡萄糖0.5～0.8％、淀粉0.2～0.4％、豆餅粉1～2％、2.2～4.0％硫酸錳0.1～0.3％、磷酸氫二鉀0.15～0.45％、磷酸二氫鉀0.1～0.2％、硫酸鎂0.03～0.06％、酵母粉0.5～1.5％、蛋白胨0.4～0.8％、氯化鐵0.005～0.015％、碳酸鈣0.05～0.15％，補充水至100％，pH值6.8～7.5；

2)發酵罐發酵條件為：培養基裝液量占發酵罐體積的40-70％，接種占培養基體積的1-5％的搖瓶發酵液，發酵溫度28-35℃，通氣量1∶04～0.7，攪拌轉數180～250r/min，發酵時間18～24h。

2.根據權利要求1所述的生產工藝，其特征在于，所述的搖瓶發酵培養條件為發酵溫度30℃，pH值7.0，搖床轉數220rpm；所述發酵培養基由如下質量組分組成，葡萄糖0.5％、淀粉0.3％、豆餅粉1.5％、3.08％硫酸錳0.2％、磷酸氫二鉀0.3％、磷酸二氫鉀0.15％、硫酸鎂0.05％、酵母粉1.0％、蛋白胨0.5％、氯化鐵0.01％、碳酸鈣0.1％，補充水至100％，pH值7.0；發酵罐發酵條件為培養基裝液量占發酵罐體積的50％，接種占培養基體積3％的搖瓶發酵液，接種時間18h，發酵溫度30℃，通氣量1∶0.5，攪拌轉數220r/min，發酵時間22h。

3.根據權利要求1所述的生產工藝，其特征在于，所述的發酵罐發酵完成時，含菌數不低于128×10⁸CFU/ml。

4.一種飼用枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，是將權利要求1或2或3所述的生產工藝中發酵罐發酵得到的枯草芽孢桿菌發酵液離心，收集菌泥；將菌泥與麥麩混合吸附，吸附后干燥，粉碎制備而成。

5.根據權利要求4所述的飼用枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，將所述的發酵罐發酵得到的枯草芽孢桿菌發酵液在離心機3000～5000rpm高速離心10～20min，收集菌泥；將菌泥與麥麩按1∶10～100質量比吸附，吸附后60～80℃干燥1～6h，粉碎到不小于60目，制備而成。

6.根據權利要求5所述的菌劑，其特征在于，將所述枯草芽孢桿菌發酵液在離心機4000rpm高速離心15min，收集菌泥，將菌泥與麥麩按1∶10質量比吸附，吸附后60℃干燥1h，粉碎。

7.權利要求4所述的飼用枯草芽孢桿菌菌劑的應用方法，其特征在于，用于制備抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、副傷寒沙門氏菌、雞白痢沙門氏菌的制劑。

8.根據權利要求7所述的應用方法，其特征在于，將所述菌劑添加到飲水或飼料中。

9.根據權利要求8所述的應用方法，其特征在于，所述的菌劑在養殖動物飼料中添加量滿足含菌數10⁸～10¹⁰CFU/kg飼料。

10.根據權利要求9所述的應用方法，其特征在于，所述養殖動物為豬或雞。