[發(fā)明專利]一種梅毒螺旋體IgM抗體快速檢測試劑條及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110427014.8
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN103163298A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李洲;許俊艷
• 申請（專利權(quán)）人: 天津中新科炬生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種梅毒螺旋體IgM抗體快速檢測試劑條，包括上樣墊(1)、膠體金墊(2)、NC膜(3)、吸樣墊(4)和塑料板(7)，其特征在于，膠體金墊上標(biāo)記有T1抗體和TP融合蛋白，NC膜上包被抗人IgMμ鏈單克隆抗體構(gòu)成T線(5)和羊抗鼠IgG抗體構(gòu)成C線(6)，所述上樣墊、膠體金墊、NC膜和吸樣墊粘貼到塑料板上形成檢測試劑條；

或膠體金墊上標(biāo)記抗人IgMμ鏈單克隆抗體，NC膜上包被TP重組抗原構(gòu)成T線(5)和羊抗鼠IgG抗體構(gòu)成C線(6)，同時包被標(biāo)示加樣位置的加樣指示線(8)，所述上樣墊、膠體金墊、NC膜和吸樣墊粘貼到塑料板上形成檢測試劑條。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑條，其特征在于，所述的TP抗原為TP15KD、TP17KD、TP47KD抗原中的一種或幾種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測試劑條，其特征在于，所述試劑條的制備方法包括以下步驟：

1)膠體金墊的制備

以氯金酸-檸檬酸三鈉還原法制備直徑為30-50nm的膠體金溶液，用0.2MK₂CO₃調(diào)節(jié)膠體金溶液的pH為8.5-9.5，然后置于磁力攪拌器上緩慢攪拌，按每100ml溶液含0.5mg-3mgT1抗體緩慢滴加所述單抗至膠體金溶液中，室溫?cái)嚢?小時，加入BSA和PEG20000封閉，12000rpm離心，棄上清，沉淀加入保存液濃縮至原體積的1/10，按每毫升1ug、2.5ug、5ug加入TP融合抗原，室溫?cái)嚢?小時左右，用金標(biāo)稀釋液將濃縮膠體金稀釋至濃度為5％、10％、15％、20％，按每毫升金標(biāo)稀釋液鋪22cm²的比例分別均勻地鋪在無紡布上，再置干燥室干燥2-4小時，切成6mm膠體金條，為膠體金墊；

標(biāo)記抗人IgMμ鏈單克隆抗體的膠體金墊的方法同上操作；

2)NC膜的制備

用0.01M?pH7.2的PBS將抗人IgMμ鏈單克隆抗體稀釋成0.4-0.6mg/ml進(jìn)行包被構(gòu)成T線；同時包被羊抗鼠IgG抗體作為質(zhì)控線C線，包被完成后干燥NC膜3～4小時；

NC膜上包被TP重組抗原的方法同上操作。