[發明專利]一種優化的適合自動化的血小板聚集功能檢測分析方法

無效

• 申請號: 201110425556.1
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN103163288A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 徐新;董自權;曹寧;周強
• 申請（專利權）人: 南京神州英諾華醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/49
• 分類號: G01N33/49
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一、技術領域

本發明涉及一種優化的通過自動測量血樣在聚集前后血小板數量變化，并依據該變化數據自動進行分析計算獲得對被檢血樣血小板聚集功能評價的一種血小板聚集功能檢測的優化的流程及分析方法，屬于臨床檢驗醫學領域。

二、背景技術

血小板聚集功能(或聚集率)是血液中血小板的一項重要功能，是評價血液凝血功能的一項重要指標。現有的血小板凝聚功能檢測方法主要是通過檢測血漿或全血中血小板聚集前后血漿(全血)中光密度(或光通性能)改變(簡稱：光學法)，或將電極放入待檢全血中觀察血樣加入誘聚劑后血小板吸附在電極上導致的電極電阻變化(簡稱：電學法)。這些方法由于都各有一定缺陷，如光學法、電學法檢測操作較繁瑣、結果誤差較大。之前亦有關于使用血液分析儀進行檢測全血加入誘聚劑后血小板數量的變化，進行血小板聚集功能進行檢測的方法。但由于現有的關于采用血液分析儀進行血小板聚集功能檢測的方法較為簡單，其還未達到較高的檢測重復性水平。因此，本方法是對計數法檢測分析血小板聚集功能的改良和優化。該流程方法適用于對采用計數方法的血小板聚集功能自動化分析儀器。

三、發明內容

本發明的優化方法是：將新鮮枸櫞酸抗凝血樣充分混勻，而后連續檢測二次，記錄血小板數量，如二次血小板數量差異小于二數值平均值的10％，則儀器自動將該二次血小板計數結果平均作為未加誘聚劑前血小板基準值；若二次計數值差異超過二次計數平均值的10％，則儀器自動對血樣再進行一次檢測，若第三次檢測獲得的血小板值與之前二次血小板計數中一個數字接近，二值之差小于二計數平均值的10％，則采用該二值的平均值作為該次檢測血小板基準值；若第三次檢測結果與前二次結果差異都較大，則儀器自動終止檢測，要求操作者對儀器進行檢查處理，而后重新開始檢測。如儀器基準值檢測通過后，儀器自動對血樣中加入誘聚劑，儀器并自動對血樣混勻、恒溫孵育，在加入誘聚劑后120秒開始，儀器對血樣連續多次進行血小板檢測計數，儀器自動將此后對血小板計數值進行平均，并將該平均值與加誘聚劑前檢測獲得的血小板基準值比較計算獲得對該血樣平均血小板聚集率值。由于現有對血小板計數儀器檢測結果往往有一定偏差，采用單次計數結果難以獲得穩定滿意的檢測結果。而采用本檢測和計算方法得到的血小板聚集率結果，更加穩定，也就能更好地反映血樣的血小板聚集功能。用該方法檢測結果(平均血小板聚集率)的計算式如下：

四、具體實施方式

本發明方法的檢測分析流程為：將準備好的待檢抗凝血樣恒溫并充分混勻，而后檢測二次血樣中血小板數量，如將二次血小板數量結果平均后以平均值與二個檢測數據比較，若二個數據差異均不超過平均值的10％，則該平均值就作為本次檢測的血小板數值的基準值。但若其中一個數據大于平均值10％，則應再對血樣進行一次檢測，若結果與之前檢測的二個數據中任何一個接近，即不超過該二個結果平均值的10％，則這二個數據的平均值就作為本次檢測的基準值。隨后，對血樣按9∶1(血：誘聚劑)加入誘聚劑，充分混勻，并計時從加誘聚劑后120秒開始連續檢測血樣中血小板數量，將加誘聚劑后檢測獲得的血小板數據平均作為聚集后血小板數量的代表，而后按照本發明設計的計算方式即可計算出該樣本的血小板聚集率值。

我們在實驗室根據，上述流程設計，以人工結合血液分析儀器按照本發明方法進行測試。具體實驗操作：隨機抽取20份新鮮血樣，每份各分為四份血樣，按照本方法流程檢測并記錄血小板數量和計算聚集率。同時，另采用20份新鮮血樣采用相同量枸櫞酸抗凝劑，用同一臺血液分析儀進行檢測記錄血小板數量，且按照現有的血小板功能檢測方法記錄最大聚集率。將二組數據進行比較，可以看出二種方法獲得的結果以本方法所獲得的結果重復性更好。

表1.用本方法檢測計算獲得血小板聚集率重復性觀察表

*說明：表中“A”、“B”、“C”、“D”則代表同一樣本分為4份樣品后各自測試結果，其中為便于數據處理，將各次血小板計數平均值小數點后數據4舍5入。

表2.用直接計數法檢測計算血小板最大聚集率觀察表

*說明：表中“A”、“B”、“C”、“D”則代表同一樣本分為4份樣品各自測試結果對應值。為便于數據處理，將各次血小板計數平均值小數點后數據4舍5入。

數據分析及結論：采用本發明方法對20個樣本分別4次檢測，累計誤差為75.49；最大誤差值的平均值為：3.77(％)。而采用最大聚集率檢測計算法獲得的血小板聚集率累計誤差為：122.12，最大誤差平均值為：6.11(％)。二者差異十分明顯。說明采用本方法進行血小板聚集率檢測結果比用最大聚集率法重復性更好。