[發(fā)明專利]包括445G>A突變的CYP2C9基因片段、所編碼的蛋白質片段及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110425399.4
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN103031318A
• 公開（公告）日: 2013-04-10
• 發(fā)明（設計）人: 胡國新;蔡劍平;戴大鵬;徐仁愛;楊麗萍
• 申請（專利權）人: 胡國新
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N15/11;C12N9/02;C12Q1/68
• 代理公司: 北京邦信陽專利商標代理有限公司 11012
• 代理人: 王昭林

1.核酸片段，所述核酸片段包含對應于SEQ?ID?NO.1的第1001位的突變位點，且是SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列中的至少10個連續(xù)核苷酸，其中第1001位的核苷酸是A；或者所述核酸片段包含對應于SEQ?ID?NO.2的第445位的突變位點，且是SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列中的至少10個連續(xù)核苷酸，其中第445位的核苷酸是A；或者為所述核酸片段的互補序列。

2.根據權利要求1所述的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段的長度是10-100、100-200、200-500或500-1000個核苷酸；優(yōu)選地，所述核酸片段的長度是10-20、20-30、30-40、40-50、50-60、60-100或100-300個核苷酸；進一步優(yōu)選地，所述核酸片段是SEQ?ID?NO.1、2、24-27所示的序列。

3.等位基因特異性寡核苷酸，所述寡核苷酸與含有對應于SEQ?ID?NO.1的第1001位或對應于SEQ?ID?NO.2的第445位的突變位點的等位基因片段或其互補序列全部或部分雜交，其中SEQ?ID?NO.1的第1001位或SEQ?ID?NO.2的第445位的突變位點的核苷酸是A；所述等位基因片段是SEQ?ID?NO.1或SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列中的至少10個連續(xù)核苷酸或其互補序列。

4.根據權利要求3所述的等位基因特異性寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸是探針或引物；優(yōu)選地，當所述寡核苷酸是探針時，所述寡核苷酸的長度是5-100個核苷酸；當所述寡核苷酸是引物時，所述寡核苷酸的長度是15-40個核苷酸；優(yōu)選地，當所述寡核苷酸是探針時，所述突變位點位于探針序列的中心或大約中心處；當所述寡核苷酸是引物時，所述突變位點位于引物的3’末端。

5.根據權利要求4所示的等位基因特異性寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸是如SEQ?ID?NO.28-33所示的序列。

6.用于檢測和/或分析單堿基突變的試劑盒，包括權利要求1或2所述的核酸片段和/或權利要求3-5任一項所述的等位基因特異性寡核苷酸；或者包含SEQ?ID?NO.6和/或SEQ?ID?NO.7和/或SEQ?ID?NO.17所示的序列片段。

7.權利要求1或2所述的核酸片段和/或權利要求3-5任一項所述的等位基因特異性寡核苷酸在檢測CYP2C9基因突變中的應用，其中所述核酸片段或寡核苷酸用作探針或引物。

8.一種用藥指導，包括檢測待測樣品中CYP2C9基因的對應于SEQ?ID?NO.1的第1001位或SEQ?ID?NO.2的第445位的單堿基突變；根據檢測到的突變，調整經CYP2C9代謝的藥物的給藥量；優(yōu)選地，所述藥物是環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、紫杉醇、華法林、醋硝香豆素、美芬妥英、甲苯磺丁脲、那格列奈、吡格列酮、羅格列酮、苯妥英、唑尼沙胺、阿莫地喹、鹽酸氯胍、奎寧、阿米替林、西酞普蘭、丙咪嗪、哌羅匹隆、舍曲林、硫利達嗪、文拉法辛、氯沙坦、厄貝沙坦、纈沙坦、雙氯芬酸、氨基比林、安替比林、塞來昔布、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、氯諾昔康、甲芬那酸、萘普生、吡羅昔康、替諾昔康、洛哌丁胺、美沙酮、嗎啡、蘭索拉唑、奧美拉唑、氯巴占、甲苯比妥或佐匹克隆。

9.一種分析核酸的方法，包括分析待測樣品中的包含對應于SEQ?ID?NO.1的序列的核酸中對應于第1001位的核苷酸或分析待測樣品中的包含對應于SEQ?ID?NO.2的序列的核酸中對應于第445位的核苷酸；優(yōu)選地，所述方法是測序法或探針雜交法。

10.CYP2C9蛋白或其片段或變異體，所述蛋白序列為SEQ?ID?NO.3所示的序列；所述片段或變異體包含對應于SEQ?ID?NO.3的第149位的蘇氨酸，并且為SEQ?ID?NO.3所示的氨基酸序列的至少10個連續(xù)氨基酸。