[發明專利]一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法

無效

• 申請號: 201110424666.6
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN102487829A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 陳月桂;譚嘉娜;楊俊賢;羅青文;楊曉仙
• 申請（專利權）人: 廣州甘蔗糖業研究所湛江甘蔗研究中心
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州市南鋒專利事務所有限公司 44228
• 代理人: 劉廣生

1.一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）外植體預處理：將從田間收獲的荸薺置于陰涼處自然風干一天后，用3~5%新潔爾滅噴施球莖表面后，用干凈紗布擦干后備用；

（2）外植體采集：將經過消毒預處理的球莖進行如下處理：用接種刀片將球莖的頂芽和健壯側芽從芽基部切下來，剝去最外層包片，置于裝有無菌水的250ml玻璃瓶中，在無菌條件下，用0.1%的升汞處理4~6min，無菌水沖洗3~5次后，接種到莖尖誘導培養基上；

（3）快速誘導培養：將步驟（2）接種好的的材料置于光照培養箱內，在高溫條件下培養1~3天，莖尖快速萌發后，轉移到常溫下培養；

（4）增殖培養：將步驟（3）萌發的莖尖接種在分化培養基上，分化出大量的叢芽；

（5）壯苗培養：將步驟（4）分化出的叢芽置于壯苗培養基上，培養20~30天，獲得健壯的叢芽；

（6）生根培養：將步驟（5）經過壯苗的叢芽切成單株接種在生根培養基中進行生根培養；

（7）移栽：當經過步驟（6）生根培養的生根苗長至3~5cm，根數3條以上時，移栽到室外。

2.?根據權利要求1所述的一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：所述的莖尖誘導培養基為：

基本培養基為MS培養基、添加激動素KT?0.1~0.?3mg/L、維生素C?Vc1.0~2.0mg/L和卡拉膠6.0g/L，PH值為5.8~6.2，誘導培養方式為固體培養。

3.根據權利要求1所述的一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：所述的增殖培養所用的分化培養基為：

基本培養基為MS培養基、添加6-芐氨基嘌呤6-BA1.0~2.0mg/L、萘乙酸NAA0.1~0.2mg/L和蔗糖40~60g/L，PH值為5.8~6.2，增殖培養方式為液體培養。

4.根據權利要求1所述的一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：所述的壯苗培養基為：

基本培養基為MS培養基、添加6-芐氨基嘌呤6-BA?0.5~1.0mg/L、萘乙酸NAA?0.1~0.5mg/L、蔗糖30~50g/L和卡拉膠6.0g/L，PH值為5.8~6.2，壯苗培養方式為固體培養。

5.根據權利要求1所述的一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：所述的生根培養基為：

基本培養基為1/2MS培養基、添加萘乙酸NAA0.1~0.3mg/L、活性炭Ac0.4~0.6g/L和蔗糖15~25g/L，PH值為5.8~6.2，生根培養方式為液體培養。

6.根據權利要求1所述的一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：步驟（6）所述的移栽，其采用的基質為沙床培養。

7.根據權利要求1一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：所述的高溫條件為溫度30~32℃，光照1000~1500lux。

8.根據權利要求1~8任意一項所述的一種粉用型荸薺綜合脫毒快繁的方法，其特征在于：所述的培養基，包括基本培養基和組培各階段培養基的各組分及其含量為：

（1）基本培養基為MS，?PH值為5.8~6.2；

（2）莖尖誘導培養基：MS培養基+?激動素KT0.?1mg/L+?維生素CVc1.0mg/L+卡拉膠6.0?g/L；

（3）分化培養基：MS培養基+6-芐氨基嘌呤6-BA2.0mg/L+萘乙酸NAA0.2mg/L+50g/L；

（4）壯苗培養基：MS培養基+?6-芐氨基嘌呤6-BA1.0mg/L+萘乙酸NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L+卡拉膠6.0?g/L；

（5）生根培養基：1/2MS培養基+萘乙酸NAA?0.2mg/L+活性炭0.5g/L+蔗糖25g/L。