[發(fā)明專利]一類基于三嗪結(jié)構(gòu)的糖標(biāo)記試劑及其合成方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110423326.1
• 申請日: 2011-12-16
• 公開（公告）號: CN102584728A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張新祥;鐵偲;周穎琳;趙明哲
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號: C07D251/46
• 分類號: C07D251/46;C07D251/52;C07D251/70;C07B59/00;G01N27/62
• 代理公司: 北京萬象新悅知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11360
• 代理人: 賈曉玲

1.一種糖標(biāo)記試劑，其特征在于：具有以下T1、T2或T3所代表的分子結(jié)構(gòu)

2.一種穩(wěn)定同位素糖標(biāo)記試劑，其特征在于，具有以下T3-1、T3-2或T3-3所代表的分子結(jié)構(gòu)

3.一種權(quán)利要求1中所述的糖標(biāo)記試劑的合成方法，其特征在于：

2-氯-4，6-二甲氧基-s-三嗪溶于一定體積有機(jī)溶劑乙腈或四氫呋喃中，加入過量的水合肼，加熱回流反應(yīng)若干小時后，將反應(yīng)液倒入足量碎冰中，有機(jī)溶劑乙醚、乙酸乙酯或二氯甲烷萃取若干次，濃縮，得到T1所示的糖標(biāo)記試劑；或

(1)將三聚氰氯溶于一定量甲醇，加入過量堿，在冰浴條件下攪拌反應(yīng)過夜，層析色譜監(jiān)控至反應(yīng)完全，待反應(yīng)完全后，將反應(yīng)溶液倒入冰水混合物中，攪拌，過濾，用水洗滌至無氯離子，真空干燥，得到白色粉末，(2)將上一步產(chǎn)物溶于一定量有機(jī)溶劑二氯甲烷、乙腈或四氫呋喃中，加入過量的三級胺N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、吡啶或咪唑，室溫下加入當(dāng)量二乙胺，室溫下攪拌繼續(xù)反應(yīng)1h-過夜，經(jīng)由薄層色譜監(jiān)測反應(yīng)完成情況，反應(yīng)完成后，用大量鹽酸溶液與水分別洗若干次，收集有機(jī)相，濃縮，(3)上步產(chǎn)物溶于一定體積的有機(jī)溶劑乙腈或四氫呋喃中，加入過量的水合肼，加熱回流反應(yīng)若干小時將反應(yīng)液倒入足量碎冰中，有機(jī)溶劑乙醚、乙酸乙酯或二氯甲烷萃取若干次，濃縮，得到T2所示的糖標(biāo)記試劑；或

(1)三聚氰氯溶于一定量有機(jī)溶劑二氯甲烷、乙腈、或四氫呋喃中，加入過量三級胺N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、吡啶或咪唑，在室溫下加入過量二乙胺，室溫下攪拌繼續(xù)反應(yīng)1h-過夜，經(jīng)由薄層色譜監(jiān)測反應(yīng)完成情況，反應(yīng)完成后，用大量鹽酸溶液與水分別洗若干次，收集有機(jī)相，濃縮，(2)上步產(chǎn)物溶于一定體積有機(jī)溶劑乙腈或四氫呋喃中，加入過量的水合肼，加熱回流反應(yīng)若干小時，將反應(yīng)液倒入足量碎冰中，有機(jī)溶劑乙醚、乙酸乙酯或二氯甲烷萃取若干次，濃縮，得到T3所示的糖標(biāo)記試劑。

4.一種權(quán)利要求2中所述的穩(wěn)定同位素糖標(biāo)記試劑的合成方法，其特征在于：

(1)三聚氯氰溶于一定量有機(jī)溶劑二氯甲烷、乙腈或四氫呋喃中，加入過量三級胺N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、吡啶或咪唑，在室溫下加入過量氘代二乙胺或15N代二乙胺，室溫下攪拌繼續(xù)反應(yīng)1h-24h，經(jīng)由薄層色譜監(jiān)測反應(yīng)完成情況，反應(yīng)完成后，用大量鹽酸水溶液與水分別洗若干次，收集有機(jī)相，濃縮，(2)上步產(chǎn)物溶于一定體積有機(jī)溶劑乙腈或四氫呋喃中，加入過量的水合肼，加熱回流反應(yīng)若干小時，將反應(yīng)液倒入足量碎冰中，有機(jī)溶劑乙醚、乙酸乙酯或二氯甲烷萃取若干次，濃縮，得到T3-1或T3-2所示的穩(wěn)定同位素糖標(biāo)記試劑；或

(1)¹³C代三聚氯氰溶于一定量有機(jī)溶劑二氯甲烷、乙腈或四氫呋喃，加入過量三級胺N，N-二異丙基乙胺、三乙胺、吡啶或咪唑，在室溫下加入過量二乙胺，室溫下攪拌繼續(xù)反應(yīng)1h-24h，經(jīng)由薄層色譜監(jiān)測反應(yīng)完成情況，反應(yīng)完成后，用大量鹽酸水溶液與水分別洗三次，收集有機(jī)相，濃縮，(2)上步產(chǎn)物溶于一定體積有機(jī)溶劑乙腈或四氫呋喃中，加入過量的水合肼，加熱回流反應(yīng)若干小時，將反應(yīng)液倒入足量碎冰中，有機(jī)溶劑乙醚、乙酸乙酯或二氯甲烷萃取三次，濃縮得到T3-3所示的穩(wěn)定同位素糖標(biāo)記試劑。

5.權(quán)利要求1或2所述的糖標(biāo)記試劑在毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜連用分析、即CE-MS分析中的應(yīng)用。

6.一種基于權(quán)利要求1中的糖標(biāo)記試劑T1、T2的多糖標(biāo)記方法，其特征在于，

將過量的標(biāo)記試劑T1或T2加入冰醋酸與DMSO的混合溶液中，體積比_V冰醋酸∶V_DMSO＝9∶1～1∶1，加入當(dāng)量的氰基硼氫化鈉，混勻，配成標(biāo)記溶液，將標(biāo)記溶液與糖類干粉樣品混合均勻，將混合溶液在65-75℃的烘箱中反應(yīng)1.5-3小時，反應(yīng)完成后經(jīng)由固相微萃取柱純化，吹干，用水重新定容，低溫保存。