[發明專利]一種櫟癭酸單體的分離純化方法

無效

• 申請號: 201110420105.9
• 申請日: 2011-12-15
• 公開（公告）號: CN102531881A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 白蘭輝;文煥松;郭建華;夏柯;劉丁
• 申請（專利權）人: 成都普思生物科技有限公司
• 主分類號: C07C57/26
• 分類號: C07C57/26;C07C51/42
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211
• 代理人: 趙麗

技術領域

本發明涉及一種植物化合物單體的制備方法，具體涉及從秦艽中提取分離櫟癭酸單體的方法，屬于中藥活性成分的分離純化技術領域。

背景技術

秦艽是龍膽科多年生草本植物，是治風濕關節痛、結核病潮熱、黃疸等癥的主藥之一。在青海尤以黃南產的秦艽質量最佳，是中國重要的傳統中藥之一，始載于《神農本草經》，列為中品，“秦艽主寒熱邪氣，寒濕風痹，肢節痛、下水、利小便。”

櫟癭酸是秦艽中特征性化學成分之一，英文名稱：Roburic?acid;?3,4-Secoursa-4(23),12-dien-3-oic?acid。化學名稱為：1-Chrysenepropanoic?acid1,2,3,4,4a,4b,5,6,6a,7,8,9,10,10a,12,12a-hexadecahydro-1,4a,4b,6a,9,10-hexamethyl-2-(1-methylethenyl)-,(1S,2S,4aR,4bS,6aR,9R,10S,10aR,12aR)，分子量為440.70,其結構式為：

由于櫟癭酸是秦艽的特征性化學成分之一，因此以櫟癭酸作為該藥材及其相關制劑的質量評價指標，既能較真實地反映其質量又具有專屬性，可對秦艽藥材及其制劑的質量控制起到重要作用。

但是，通過檢索大量文獻發現，目前只有關于秦艽中苦苷類的提取分離純化報道，未見與櫟癭酸單體分離工藝的相關專利報道。究其原因，與櫟癭酸的性質和其它含量較高的苦苷和糖類成分干擾有關，本發明優化了針對櫟癭酸成分提取分離后的一系列方法，從中得到含量較高的單體櫟癭酸成分。

發明內容

本發明的目的在于提供一種櫟癭酸單體的分離純化方法。該方法操作簡便，分離效率高，工藝穩定，成本低廉，可實現櫟癭酸單體的高純度分離制備，得到的櫟癭酸單體純度高，可作為鑒別對照品使用。

為了實現上述發明目的，本發明采用的技術方案如下：

一種櫟癭酸的分離純化方法，其特征在于：以秦艽為原料通過提取、萃取、柱分離和結晶得到櫟癭酸單體，具體包括下述主要步驟：

A、提取：

將干燥的秦艽粉碎成粗粉，加入質量百分比濃度為95%的乙醇溶液，其加入量按照藥材重量:乙醇溶液體積=Kg:(8～10)L計算，回流提取3次，每次2～3小時，提取液過濾，合并過濾液，濃縮回收乙醇，得濃浸膏待進行下一步萃取處理；

B、萃取：

將步驟A所得的濃浸膏加入1倍量80℃的水，稀釋后的浸膏水溶液再加入1倍量的乙酸乙酯萃取，共萃取3次，合并萃取后乙酸乙酯層，用真空旋蒸55℃濃縮至流浸膏，加入5倍重量的60～80目硅膠拌樣，55℃干燥，所得干燥后的拌樣硅膠備硅膠柱分離；

C、硅膠柱分離：

根據步驟B所得拌樣硅膠重量，稱取10倍量柱硅膠用二氯甲烷裝入備好的玻璃層析柱中，用二氯甲烷作為洗脫劑洗脫沉降，直至流速恒定；將步驟B中干燥后的拌樣硅膠，按照柱硅膠：拌樣硅膠10:1裝入層析柱中，用二氯甲烷洗脫，根據TLC檢測收集櫟癭酸產品段，回收二氯甲烷，得白色固體，待下一步結晶；

D、結晶：

按照白色固體:氯仿（1g:20ml）計算，將步驟C得到的白色固體用氯仿溶解，溶解完全后用納米有機膜過濾，得到氯仿濾液體積，加入2倍體積的甲醇冷藏結晶，根據晶體具體純度，重復結晶2～3次，直至純度≥98.5%，即可得到櫟癭酸單體產品。

步驟B所述柱硅膠為200～300目。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：

本發明方法是將櫟癭酸從秦艽濃乙醇提取液中分離出來，經濃縮萃取，再分離純化而得；由于減少了較大極性物質的提取，可大大簡化工藝、縮短生產周期、降低生產成本；而通過萃取、硅膠柱分離、結晶過程，通過最適宜的工藝及參數條件，使產品中櫟癭酸的含量達到98%以上；整個工藝過程操作簡便、工藝穩定、成本低廉，且分離效率高、產品純度高，即可實現櫟癭酸單體的高純度分離制備。

附圖說明

圖1是本發明實施例1所得櫟癭酸單體產品的HPLC圖譜。

具體實施方式

下面結合具體實施方式對本發明作進一步的詳細描述。

但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于下述實施例。

下述各實施例中，終產品櫟癭酸單體的純度復檢均采用反相分析型液相色譜（HPLC-ELSD）法，色譜條件如下：