[發明專利]血栓烷B2酶聯免疫測定試劑盒

無效

• 申請號: 201110420061.X
• 申請日: 2011-12-15
• 公開（公告）號: CN102520156A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 何楊;陳德春;王兆鉞;阮長耿
• 申請（專利權）人: 蘇州蘇大賽爾免疫生物技術有限公司;蘇州大學;蘇州博賽生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 曹毅

技術領域

本發明屬于酶聯免疫測定試劑盒，具體的涉及一種血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒。

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背景技術

血栓烷A₂是血小板花生四烯酸代謝的主要產物，也可產生于肺、腎等組織，血栓烷A₂是機體最強的促血小板聚集物質與血管收縮物質。血栓烷B₂（以下簡稱TXB₂）是血栓烷A₂的穩定的代謝產物。

在動脈粥樣硬化、血栓栓塞性疾病、糖尿病與腫瘤轉移等疾病中，血漿TXB₂含量增高。在先天性血小板花生四烯酸代謝障礙性疾病或服用阿司匹林類非甾體抗炎藥物后，血小板TXB₂生成明顯減少。

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發明內容

本發明的目的在于提供一種血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒。

為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明通過以下技術方案實現：

本發明的血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒，包括：

1）已包被TXB₂-牛血清白蛋白連接物酶標板，-20℃保存；

2）明膠；

3）TXB₂標準品，4℃保存；

4）抗體TXB₂-IgG，4℃保存；

5）羊抗兔IgG-辣根過氧化物酶結合物，-20℃保存；

6）鄰苯二胺；

7）稀釋液，用前用蒸餾水作1:20稀釋；

8）底物液，用前用蒸餾水作1:5稀釋。

本發明的檢測原理如下：

抗原（TXB₂-BSA）包被固相載體，與游離抗原（標準品或待測樣品）競爭性地與一定量得抗體結合，洗滌后加過量酶標抗體，再加底物顯色。根據顯色程度（OD值）即可從標準曲線上推算出待測樣品TXB₂含量。

與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：

1、本發明的血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒合具有良好的特異性，可有效測定人和動物的血漿、血細胞、體液或組織中的TXB₂的濃度；

2、本發明的血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒合在動脈粥樣硬化、血栓栓塞性疾病、糖尿病與腫瘤轉移等疾病中的鑒別診斷靈敏度高，可保證良好的線性關系；

3、本發明的血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒合在-20℃條件下可可保存6個月。

上述說明僅是本發明技術方案的概述，為了能夠更清楚了解本發明的技術技術方案，并可依照說明書的內容予以實施，以下以本發明的較佳實施例。

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具體實施方式

一種血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒，其包括：

1）已包被TXB₂-牛血清白蛋白連接物酶標板，-20℃保存；

2）明膠，1g/瓶；

3）TXB₂標準品，1600pg/ml，4℃保存；

4）抗體TXB₂-IgG，1ml，滴度為1:2000，4℃保存；

5）羊抗兔IgG-辣根過氧化物酶結合物（GARIgG-HRP），100ug/ml，-20℃保存；

6）鄰苯二胺（OPD），15mg/瓶；

7）稀釋液（PBS），0.2M，用前用蒸餾水作1:20稀釋；

8）底物液（Buffer2），0.1M，用前用蒸餾水作1:5稀釋。

利用本發明的血栓烷B₂酶聯免疫測定試劑盒的檢測步驟如下：

1、一次反應

將TXB₂標準品用0.1%明膠倍比稀釋成8個濃度：1.25、2.5、5、10、20、40、80和160?pg/0.1ml，用0.1%明膠（PBS配制）將抗TXB₂-IgG作1:10稀釋。

零標準（B0）孔加稀釋液100ul，標準（ST）孔加TXB₂標準品100ul，樣品（SMP）孔加待測樣品100ul。

各孔均加抗體TXB₂-IgG100ul（TA孔除外）。

37℃?2hr或室溫下4hr。

tween-PBS稀釋液洗板5次。

2、二次反應