[發明專利]一種肌內脂肪沉積HFABP基因

無效

• 申請號: 201110418491.8
• 申請日: 2011-12-15
• 公開（公告）號: CN102392026A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 高士爭;趙素梅;潘洪彬;王靜;黃英;楊明華
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/47;C12Q1/68
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司 53114
• 代理人: 唐德林

技術領域

本發明涉及動物分子育種的基因工程技術，特別是一種與豬肌內脂肪沉積相關的心型脂肪酸結合蛋白（Heart-type?fatty?acid?binding?protein，HFABP）基因技術。

背景技術

近年來，由于豬的選育工作中過度追求高瘦肉率，導致豬肉品質的嚴重下降。隨著生活水平的不斷提高，人們對豬肉顏色、嫩度、風味等肉品質特性的要求也越來越高。肌內脂肪（intramuscular?fat,?IMF）是影響肉品質的重要因素，目前已得到越來越多的認識和重視。肌內脂肪的沉積是一個復雜的生理生化過程，主要涉及肌肉內甘油三酯的代謝，包括甘油三酯的合成、分解及轉運等過程。因此，肌內脂肪細胞內的脂類代謝是肌內脂肪沉積的基礎。

脂肪酸結合蛋白（FABP）是一類廣泛分布于機體各種組織的低分子量胞漿蛋白，通常與疏水配基相結合。這類蛋白主要參與細胞內脂肪酸的運輸，可以將脂肪酸從細胞膜上運送到甘油三酯或磷脂合成的位點，防止細胞內堆積過多的游離脂肪酸，并維持脂肪細胞脂解和脂肪合成之間代謝的動態平衡。脂肪酸結合蛋白能夠促進細胞的生長和分化。研究表明，長鏈脂肪酸對脂肪細胞的分化具有促進作用，這種促分化作用被認為是由過氧化物酶體增生物激活受體γ（peroxisome?Proliferator-activated?receptor?γ，PPARγ）介導的。

到目前為止，FABPs家族中已發現至少有十一種結構不同的類型，其中心型脂肪酸結合蛋白(Heart-type?fatty?acid?binding?protein，HFABP)主要在心肌、骨骼肌和乳腺等組織表達。不同類型?FABPs?基因的表達模式與其所分布的細胞類型、功能和分化發育過程有關。研究發現HFABP在已完成分化的細胞中大量表達，一般這類細胞都具有較高的脂肪酸代謝水平。FABPs與組織脂肪酸氧化能力有著直接的聯系。總體上，HFABP表達水平與脂肪酸氧化能力由低到高的順序為：白肌《紅肌<心肌。Chang等（2001）證實長鏈脂肪酸是在轉錄起始階段誘導HFABP的基因表達。他們通過體外培育成年老鼠成肌細胞和心肌細胞，在長鏈脂肪酸培育30min后，HFABP的轉錄產物增加了2倍。

國外育種專家研究發現，豬HFABP基因是?IMF?的候選基因，該基因定位于豬的6號染色體上，是影響?IMF含量的主要因素之一。Gerbens等（1999）研究了HFABP基因的遺傳變異對IMF和生產性狀的影響，研究對兩種HFABP純合基因型杜洛克豬后代進行了IMF和背膘厚的比較。結果表明,?HFABP對IMF含量有顯著相關(P<0.05)。2001年，Gerbens等進一步研究了HFABP基因表達與IMF含量的關系，他以153頭梅山豬的雜交后代作為供試群體，測定了HFABP和AFABP基因的多態性、mRNA、蛋白質的表達水平和背最長肌上的IMF含量。分析結果表明HFABP和AFABP基因的mRNA與肌內脂肪含量顯著相關。目前，HFABP基因的表達調控豬脂肪沉積和肌肉脂肪代謝的確切作用及其分子機制還不清楚。

發明內容

本發明的目的是提供一種肌內脂肪沉積HFABP基因，采用基因芯片技術和生物信息學分析方法，在對豬肌肉組織和肌內脂肪細胞基因表達譜的研究中發現HFABP基因參與肌內脂肪細胞脂類代謝過程，并首次從版納微型豬肌肉組織中克隆了HFABP基因。

具體為：

一種肌內脂肪沉積HFABP基因，是從版納微型豬肌肉組織中分離、克隆的與肌內脂肪沉積相關的心型脂肪酸結合蛋白(HFABP)基因，基因的CDS序列全長為402bp,?其CDS核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1。并且，CDS核苷酸序列編碼133個氨基酸，氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2。?對上述特征的肌內脂肪沉積HFABP基因設計引物，進行PCR擴增，檢測HFABP基因在豬心、肝、脾、肺、腎、肌肉和脂肪七個組織的組織表達譜，結果顯示HFABP基因在心臟組織中表達量最高，脂肪組織其次，初步表明HFABP基因在脂肪細胞中調控脂肪沉積的功能。