[發明專利]使用NK細胞增效化合物提高治療性抗體功效的方法和組合物

有效

• 申請號: 201110414480.2
• 申請日: 2004-07-23
• 公開（公告）號: CN102772798A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 安德烈亞·韋拉爾迪;弗朗索瓦·羅馬涅
• 申請（專利權）人: 依奈特制藥公司;佩魯賈研究大學
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61P29/00;A61P31/00;A61P31/12;A61P35/00;A61P37/02;A61P37/06
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 李丙林;張英

技術領域

本發明總體上涉及提高治療性抗體功效的方法和組合物。更具體而言，本發明涉及治療性抗體與阻斷自然殺傷細胞的抑制性受體或刺激自然殺傷細胞的活化受體的化合物的聯合使用，從而使得哺乳動物患者的自然殺傷細胞的細胞毒性效用增強，尤其是通過提升ADCC機制以增強在人類患者中的治療功效。?

背景技術

人類的許多治療方案都是建立在使用治療性抗體的基礎之上。這些包括，例如使用已開發的治療性抗體來使靶細胞衰竭，特別是病態細胞如病毒侵染的細胞、腫瘤細胞或其它病源細胞。這些抗體是典型的IgG類的單克隆抗體，典型的是具有人IgG1或IgG3?Fc部分。這些抗體可以是天然抗體或重組抗體，并且通常是″人源化″的小鼠抗體(即，包括來自各種物種的功能域，典型的是人或非人靈長類的Fc部分、并帶有小鼠源的可變區或互補決定區(CDR))。可選替代的是，該單克隆抗體可以在具有人Ig位點的轉基因的小鼠中通過免疫作用而完全人源化，或通過由衍生自人類細胞的cDNA文庫獲得。?

該治療性抗體的一個特殊的例子是利妥昔單抗(rituximab)(美羅華?)，它是一種由人γ1和K恒定區(因而帶有人IgG1?Fc部分)與帶有CD20特異性的鼠可變區連接成的嵌合?抗-CD20單克隆抗體。在過去的幾年中，利妥昔單抗已經極大地改變了對B淋巴細胞增生性癌變，尤其是非霍奇金淋巴瘤(NHL)的治療方案。人源化的IgG1抗體的其它例子包括用于治療B細胞惡性腫瘤(癌變)的阿來組單抗(alemtuzumab)?和用于治療乳腺癌的曲妥珠單抗(trastuzumab)?開發中的治療性抗體的其它例子正在本領域中出現。?

治療性抗體的作用機制仍然是一個爭論的話題。注入抗體，導致帶有被該抗體特異性識別抗原的細胞的衰竭。該衰竭作用可以通過至少3種機制來介導：抗體介導的細胞毒性(ADCC)、補體依賴型溶解、和通過作為抗體靶標的抗原給出的信號對腫瘤生長的直接抗腫瘤抑制。?

盡管這些抗體代表了一種人類治療，尤其是對于治療腫瘤，的全新和有效的方法，但是它們并不都具有很強的療效。例如，盡管利妥昔單抗單獨施用(給予)或與化療藥物聯合施用(給予)顯示出對于治療中低度和高度NHL有效，但是30％至50％的低度NHL患者對于利妥昔單抗沒有臨床反應。有人提出淋巴細胞表面上的CD20表達水平、治療期間存在的高腫瘤負荷、或血清中利妥昔單抗的低濃度可以解釋為什么在一些患者中利妥昔單抗沒有療效。然而，治療失敗的實際原因在很大程度上仍然是未知的。?

另外，由于施用治療性抗體的副作用，使得治療性抗體的使用受到了限制。例如，在患者中出現的發熱、頭痛、惡心、低血壓、哮喘、皮疹、感染和許多其它可能出現的副作用潛在地限制了施用抗體的可能劑量或頻率。?

因此，提高治療性抗體的療效或者能夠減少抗體的使用劑量來實現療效從而盡量減少可能產生的副作用，是令人感興趣的。本發明將著手解決這些問題及其它需要。?

發明內容

本發明披露了增強治療性抗體功效的新方法。無須受下述理論的限制，我們認為使用本發明方法所得到驚人的結果是由于：當注入治療性抗體時，它們在體內能夠強化ADCC機制。實際上，本發明提供的全新的組合物和方法能夠克服目前與治療性抗體療效相關的困難。在本發明中可以看到來自個體的NK細胞由于缺少NK細胞的活化，即通過在抑制NK細胞上的抑制受體，而具有很差的治療性單克隆抗體(mAb)介導的ADCC。優選地，ADCC機制的提高是通過施用阻斷在自然殺傷細胞上的抑制受體或刺激在自然殺傷細胞上的活化受體的化合物，從而促進哺乳動物患者增強自然殺傷細胞的細胞毒性作用來實現的。優選的化合物是抗體或其片段。?

所述抗體或其它化合物可以與NK細胞的抑制性受體(例如殺傷細胞抑制性受體(KIR或NKG2A/C)分子進行反應，或與其活化受體(例如NK細胞上的NKp30、NKp44或NKp46這樣的NCR)反應，從而中和細胞的抑制作用并且增加了其ADCC活性。?

更具體而言，本發明披露了治療患者的方法，其中阻斷NK細胞抑制性受體或刺激其活化受體的化合物，優選是抗體或其片段，與治療性抗體聯合施用于患者。本文中發明人證明了治療性抗體通過如共注射方式與優選為抗體或其片段的這類化合物聯合施用，通過例如阻斷NK細胞的抑制性受體或刺激NK細胞的活化受體而克服了NK細胞的抑制，從而可以極大地增強其治療功效。?