[發明專利]一種加壓毛細管電色譜儀檢測對蝦中氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑殘留的方法

有效

• 申請號: 201110414063.8
• 申請日: 2011-12-13
• 公開（公告）號: CN102645501A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 曹國洲;肖道清;朱曉艷;劉在美;楊文潮;陳少鴻;鄭琳;陳建國;董潔瑩
• 申請（專利權）人: 寧波檢驗檢疫科學技術研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司 33102
• 代理人: 袁忠衛

1.一種加壓毛細管電色譜儀檢測對蝦中氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑殘留的方法，其特征在于包括以下步驟：

1)樣品制備：將對蝦去頭后肌肉組織樣品剪碎后均質，冷凍保存；

2)樣品預處理：將樣品經乙酸乙酯離心提取，正己烷脫脂旋轉蒸干后，用乙腈溶解殘渣，再經0.20～0.24μm濾膜過濾后供毛細管電色譜測定用；

3)配制氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑標準溶液；

4)采用加壓毛細管電色譜進行分析：以反相鍵和C18為填料的毛細管電色譜柱作為檢測柱；流動相采用11～13mmol/L，pH＝4～6的磷酸鹽氫二胺緩沖液與乙腈的混合液，其體積比為90～70∶10～30；在所加電壓為-3～-5kv，柱壓為9.6～9.8MP，柱溫為常溫，流動相的流速：40～60μL/min；進樣量：0.9～1.1μL的工藝條件下，用紫外檢測器在波長275nm處進行檢測，同時繪制標準曲線；

5)將樣品經檢測分析后根據其保留時間進行定量分析，利用外標法根據其峰面積進行定量分析。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟2)具體過程為：準確稱取2±0.01g均質樣品置于50mL離心管中，加入乙腈8～12mL，用渦旋混合器充分混勻4～6min，3000～5000r/min離心8～12min，收集上清液，再向原離心管中加入8～12mL乙酸乙酯重復提取一次，合并兩次上清液；加入14～16mL正己烷脫脂兩次后，溶液于35～45℃旋轉蒸發至干，用乙腈溶解后過膜上機使用。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑標準溶液的配制為：分別稱取氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑標準品10.0mg±0.01g，用50％甲醇水溶液溶解并定容于100ml容量瓶中，配成質量濃度為100mg/L標準儲備溶液。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述流動相采用12mmol/L，pH＝5的磷酸鹽氫二胺緩沖液與乙腈的混合液，所述流動相的配制過程為：取乙腈、重蒸水、120mmol/L磷酸鹽氫二胺按體積比為20∶70∶10的比列配成流動相，超聲波脫氣20～40min。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述氯霉素、甲砜霉素、甲硝唑標準溶液檢測前需用流動相稀釋成0.1～5μg/mL的標準工作液。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟4)的所述電壓為-4kv，柱壓為9.7MP，柱溫為常溫，流動相的流速：50μL/min；進樣量：1.0μL。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟4)的毛細管電色譜柱選用規格EP-100-20/45-3-C18，內徑100μm，有效柱長20cm，填料粒徑3μm?ODS柱。