[發(fā)明專利]一種重組人單純皰疹病毒II蛋白及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110413442.5
• 申請(qǐng)日: 2011-12-13
• 公開（公告）號(hào): CN102492699A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王志新;陳廷友;張曉剛;王健;畢大偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京英諾特生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/38
• 分類號(hào): C12N15/38;C12N15/63;C12N1/21;C07K14/035;G01N33/569;C12R1/19
• 代理公司: 北京君智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 11305
• 代理人: 呂世靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因工程、疫苗研制和診斷試劑等領(lǐng)域，具體地涉及一種人單純皰疹病毒II蛋白及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

單純皰疹病毒(Herpes?simplex?virus，HSV)呈球形，基因組為一線性DNA分子，由共價(jià)連接的長(zhǎng)片段(L)和短片段(S)組成。30多種不同蛋白組成病毒結(jié)構(gòu)蛋白(如衣殼蛋白、囊膜蛋白)，保護(hù)HSV的DNA，在HSV的致病作用和誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答中起重要作用。

病人是傳染源，主要通過(guò)直接密切接觸和性接觸傳播。HSV經(jīng)口腔、呼吸道、生殖道粘膜和破損皮膚等多種途徑侵入機(jī)體。人感染非常普遍，感染率達(dá)80％～90％，常見的臨床表現(xiàn)是粘膜或皮膚局部集聚的皰疹，偶而也可發(fā)生嚴(yán)重的全身性疾病，累及內(nèi)臟。

HSV還可通過(guò)胎盤感染，影響胚胎細(xì)胞有絲分裂，易發(fā)生流產(chǎn)、造成胎兒畸形、智力低下等先天性疾病。約40％～60％的新生兒在通過(guò)HSV感染的產(chǎn)道時(shí)可被感染，出現(xiàn)高熱、呼吸困難和中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變，其中60％～70％受染新生兒可因此而死亡，幸存者中后遺癥可達(dá)95％。此外一些調(diào)查研究表明HSV可能與唇癌、外陰癌及子宮頸癌有關(guān)(Kriebs?JM.Understanding?herpes?simplex?virus：transmission，diagnosis，and?considerations?in?pregnancy?management.J?Midwifery?Womens?Health.2008May-Jun；53(3)：202-8)。建立HSV感染的快速、準(zhǔn)確檢測(cè)方法是預(yù)防HSV感染的關(guān)鍵所在。

目前皰疹病毒感染診斷方法有病毒分離(Tanchev?S，Shentov?B.Herpes?simplex?virus?infection?in?pregnancy?and?transmission?to?neonatal.Akush?Ginekol(Sofiia).2005；44(6)：31-5.)、PCR法(Kimberlin?DW.Diagnosis?of?herpes?simplex?virus?in?the?era?of?polymerase?chain?reaction.Pediatr?Infect?Dis?J.2006Sep；25(9)：841-2.)和血清學(xué)檢查(Eing?BR，Lippelt?L，Lorentzen?EU，et?al.Evaluation?of?confirmatory?strategies?for?detection?of?type-specific?antibodies?against?herpes?simplex?virus?type?2.Journal?of?Clinical?Microbiology.2002，40(2)：407-413；Strick?L，Wald?A.Type-specific?testing?for?herpes?simplex?virus[J].Expert?Rev?Mol?Diagn，2004，4(4)：443-453；Martins?TB，Welch?RJ，Hill?HR，Litwin?CM.Comparison?of?a?Multiplexed?HSV?Type-specific?IgMSerology?Assay?to?ELISA，Immunoblot?and?Western?Blot.Clin?Vaccine?Immunol.2008Nov?19.)。血清學(xué)檢查簡(jiǎn)便快速的特性使其在臨床上得到廣泛應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種用基因工程方法生產(chǎn)的重組抗原，能夠避免由于蛋白質(zhì)抗原純度低或特異性差造成假陽(yáng)性而降低檢測(cè)特異性等問(wèn)題，為人皰疹病毒感染的檢測(cè)提供更為特異、準(zhǔn)確的原料。

在全球范圍內(nèi)，目前缺乏有效治療病毒感染藥物的情況下，通過(guò)接種疫苗預(yù)防病毒感染成為一種重要的醫(yī)學(xué)干預(yù)手段。同時(shí)，HSV疫苗的研制也是進(jìn)行HSV研究的重要領(lǐng)域之一。本發(fā)明提供的HSV蛋白抗原具有高特異性、強(qiáng)免疫原性和盡量完整的抗原決定簇，在HSV疫苗研制領(lǐng)域具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

(一)要解決的技術(shù)問(wèn)題

本發(fā)明的目的是提供一種重組人單純皰疹病毒II蛋白，本發(fā)明的另一目的是提供該重組人單純皰疹病毒II蛋白在制備檢測(cè)試劑盒中的應(yīng)用。

(二)本發(fā)明的技術(shù)方案

本發(fā)明提供了一種編碼人單純皰疹病毒II蛋白的重組DNA，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。同時(shí)提供了由該重組DNA序列編碼的人單純皰疹病毒II蛋白，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：2所示。