[發(fā)明專利]畢赤酵母制備刀額新對蝦精氨酸激酶的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110413167.7 | 申請日： | 2011-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN102392042A | 公開（公告）日： | 2012-03-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陳偉;鄭海軍;尤春霞;李靜;劉群英;鄔敏辰;吳靜 | 申請（專利權(quán)）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N15/81 | 分類號： | C12N15/81;C12N1/19;C12N9/12;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 酵母 制備 刀額新 對蝦 精氨酸 激酶 方法 | ||
1.一種刀額新對蝦精氨酸激酶的重組真核表達載體，其特征在于，所述的重組真核表達載體中插入了刀額新對蝦精氨酸激酶的編碼基因。
2.如權(quán)利要求1所述的重組真核表達載體中的刀額新對蝦精氨酸激酶的編碼基因，其DNA的核苷酸序列對應(yīng)于序列表中的SEQ?ID?NO：1。
3.如權(quán)利要求1所述的重組真核表達載體中的刀額新對蝦精氨酸激酶的編碼基因，其編碼產(chǎn)物的氨基酸序列對應(yīng)于序列表中的SEQ?ID?NO：2。
4.一種重組畢赤酵母工程菌，其特征在于，所述的重組畢赤酵母的染色體中整合有權(quán)利要求1所述的刀額新對蝦精氨酸激酶的編碼基因，并且分泌表達重組刀額新對蝦精氨酸激酶至培養(yǎng)液中。
5.一種制備重組刀額新對蝦精氨酸激酶的方法，其特征在于，包括步驟：
(1)用適當?shù)呐囵B(yǎng)液，培養(yǎng)權(quán)利要求4所述的重組畢赤酵母工程菌；
(2)在培養(yǎng)液中添加適當?shù)恼T導劑，誘導重組畢赤酵母工程菌分泌表達重組刀額新對蝦精氨酸激酶；
(3)從培養(yǎng)液中分離純化出重組畢赤酵母分泌表達的重組刀額新對蝦精氨酸激酶。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)所用的培養(yǎng)液為BMGY培養(yǎng)液和BMMY培養(yǎng)液；步驟(2)所用的誘導劑為甲醇，添加甲醇的終濃度為培養(yǎng)液體積的0.5～1％；步驟(3)所用的分離純化重組刀額新對蝦精氨酸激酶的方法為先用弱陰離子型離子交換層析分離培養(yǎng)液中的重組刀額新對蝦精氨酸激酶，再用凝膠過濾層析得到純化的重組刀額新對蝦精氨酸激酶。
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