[發明專利]基于高效液相色譜指紋圖譜的遠志的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201110412885.2
• 申請日: 2011-12-12
• 公開（公告）號: CN102565216A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 田洪嶺;趙云生;王耀琴;郭淑紅;程永鋼;郝耀鵬;魏海英;張成榮
• 申請（專利權）人: 山西省農業科學院經濟作物研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;王加嶺

1.基于高效液相色譜指紋圖譜的遠志的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：采用索氏提取法，具體為：精密稱取不同來源的供試品遠志粉末2g，置索氏提取器中，加入甲醇100ml，加熱回流5h，減壓濃縮提取液，回收甲醇至干；在上述提取物粉末中分別加入20ml的乙醚、乙酸乙酯及水飽和正丁醇超聲，每次0.5h，分別回收乙醚、乙酸乙酯或正丁醇部位溶劑至干，加70％甲醇定容至10ml容量瓶，即得；

(2)色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：以乙腈-0.05％磷酸溶液梯度洗脫，洗脫梯度見下表；柱溫30℃；流速1.0ml·min^-1；紫外檢測波長為314nm；

乙腈-0.05％磷酸溶液梯度洗脫

(3)測定：精密吸取各供試品溶液5μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定，得到遠志指紋圖譜；

(4)對照圖譜：采用中藥色譜指紋圖譜相似性評價系統軟件對各供試品的指紋圖譜進行分析，生成遠志對照指紋圖譜；

(5)遠志樣品的質量檢測：取遠志粉末樣品，按步驟(1)至步驟(3)同法操作，得到遠志樣品指紋圖譜，采用中藥色譜指紋圖譜相似性評價系統軟件對所述樣品指紋圖譜和遠志對照指紋圖譜進行分析。

2.遠志高效液相色譜標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于，按照權利要求1或2所述的方法構建23批遠志高效液相色譜指紋圖譜，采用中藥色譜指紋圖譜相似性評價系統軟件生成由16個共有峰構成的遠志高效液相色譜標準指紋圖譜。

3.遠志的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)對照品溶液的制備：精密稱取遠志酸對照品，加入甲醇制成每ml含374μg的溶液；

(2)樣品溶液的制備：采用索氏提取法，具體為：精密稱取不同來源的供試品遠志粉末1g，置索氏提取器中，加入甲醇100ml，加熱回流5h，減壓回收甲醇至干，殘渣加入10％稀鹽酸20ml，沸水浴回流2h，冷卻，過濾并用蒸餾水洗滌沉淀至中性，用甲醇溶解沉淀并定容至10ml，即得；

(3)色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：以體積比為7∶3的甲醇-0.2％磷酸溶液洗脫；理論塔板系數以遠志酸計7190；柱溫30℃；流速1.0ml·min-1；紫外檢測波長為210nm；

(4)測定及標準曲線的繪制：分別精密吸取對照品溶液1、2、4、6、8、10、15、20、25、30μl注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以對照品質量X為橫坐標，峰面積積分值Y為縱坐標，繪制標準曲線，經回歸處理，得回歸方程：Y＝3.8663x-0.3909，R＝0.9999；

(5)樣品遠志酸含量的測定：精密吸取樣品溶液5μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄遠志酸峰面積，計算遠志酸含量。