[發(fā)明專利]芽胞桿菌Gxw4-2培育及其防治害蟲方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110409360.3
• 申請(qǐng)日: 2011-12-06
• 公開（公告）號(hào): CN103173370A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高小文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 高小文
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/02;A01P7/04;C12R1/07
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1.芽胞桿菌Gxw4-2培育及其防治害蟲方法包括芽胞桿菌Gxw4-2的培育和芽胞桿菌Gxw4-2用于害蟲防治的方法。其特征在于：采用二級(jí)培養(yǎng)法培育芽胞桿菌Gxw4-2，獲得一種生物殺蟲劑，經(jīng)稀釋后噴施于植物表皮，用于植物鱗翅目害蟲的防治。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芽胞桿菌(拉丁文學(xué)名為Bacillus?sp)gxw4-2，是解剖罹病死亡的植物害蟲尸體提取、篩選的一種植物害蟲病原菌，該菌種于2011年1月26日在中國(guó)典型微生物保藏中心(cctcc)保藏，保藏編號(hào)為：cctcc?no:m2011027。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芽胞桿菌Gxw4-2培育，其特征包括以下步驟：

(1)解剖罹病死亡的害蟲尸體，分離、提取芽胞桿菌Gxw4-2菌株。

(2)將LB培養(yǎng)基裝入容器中，加入重量百分比為2％的鈣粉，滅菌。當(dāng)培養(yǎng)容器溫度為28-32℃時(shí)，將芽胞桿菌Gxw4-2接種于培養(yǎng)容器中，在28-32℃生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)獲得芽胞桿菌GXW4-2菌落。

(3)將不加瓊脂的LB培養(yǎng)基煮沸后過濾，在濾液中加入重量百分比為2％的鈣粉，滅菌后得到培養(yǎng)液。待培養(yǎng)液冷卻至32-36℃時(shí)，將步驟(2)所得胞子在無菌條件下接種至培養(yǎng)液中，在溶氧13-15％、PH6-8、溫度范圍32-36℃的環(huán)境下發(fā)酵36-38小時(shí)，得到≥105億個(gè)胞子/ml芽胞桿菌GXW4-2懸浮液。

(4)將培養(yǎng)的105億個(gè)胞子/ml芽胞桿菌GXW4-2懸浮液離心脫水后移至冷凍干燥箱內(nèi)，經(jīng)-5℃、-15℃、-75℃條件下冷凍干燥，使其水份含量小于3％，經(jīng)200目粉碎后，得到生物殺蟲劑≥500億個(gè)胞子/g芽胞桿菌GXW4-2菌種(原藥)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芽胞桿菌Gxw4-2防治害蟲方法，其特征在于：將芽胞桿菌GXW4-2懸浮液或者芽胞桿菌GXW4-2原藥用一定量的清水稀釋后均勻噴施于植物表皮用于鱗翅目害蟲的防治。