[發明專利]檢測雞白血病病毒細胞受體基因型的引物組及其應用

無效

• 申請號: 201110408140.9
• 申請日: 2011-12-09
• 公開（公告）號: CN102433333A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發明（設計）人: 張沅;楊潔;俞英;楊寧;孫東曉
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.PCR擴增雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因片段的引物組，由用于擴增雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因片段的特異引物對和通用引物組成；所述雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因片段為包括所述TVB基因編碼序列的第172位和第184位核苷酸在內的所述雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因片段；

所述通用引物的核苷酸序列是序列表中序列3；所述特異引物對由兩條特異引物組成，其中一條特異引物的5’端連接有所述通用引物，將該引物稱為特異引物A；另一條特異引物的5’端不連接所述通用引物，將該引物稱為特異引物B。

2.根據權利要求1所述的引物組，其特征在于：在PCR擴增所述TVB基因片段的反應中，所述特異引物A、所述特異引物B和所述通用引物的摩爾比為1∶10∶9。

3.根據權利要求1或2所述的引物組，其特征在于：所述特異引物A的核苷酸序列為序列表中的序列2；所述特異引物B的核苷酸序列為序列表中的序列1。

4.檢測雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因型的引物組，包括權利要求1-3中任一所述引物組，和對用所述特異引物對PCR擴增得到的產物進行測序的測序引物。

5.檢測雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因型的引物組，由權利要求1-3中任一所述引物組，和對用所述特異引物對PCR擴增得到的產物進行測序的測序引物組成。

6.根據權利要求4或5所述的引物組，其特征在于：所述測序引物的核苷酸序列為序列表中的序列4。

7.權利要求1-6中任一所述的引物組在制備下述1)或2)中的應用：

1)PCR擴增雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因片段的試劑或試劑盒；

2)檢測雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因型的試劑或試劑盒。

8.權利要求1-6中任一所述引物組，在PCR擴增雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因片段，或檢測雞白血病病毒細胞受體基因TVB基因型中的應用；

所述應用中，利用權利要求1-6中任一所述引物組中的通用引物、特異引物A和特異引物B對待測樣品進行PCR擴增，得到PCR擴增產物；利用權利要求4-6中任一所述引物組中的所述測序引物對所述PCR擴增產物進行焦磷酸測序；根據測序結果確定雞白血病病毒細胞受體基因TVB的基因型。

9.權利要求1-6中任一所述的引物組在雞育種中的應用，所述應用中，用權利要求1-6中任一所述的引物組檢測雞白血病病毒細胞受體基因TVB的基因型，選擇TVB*R/R基因型的雞進行育種；所述TVB*R/R基因型是所述TVB基因序列的第172位核苷酸為T，同時第184位核苷酸為T或A的純合型；所述第172位核苷酸對應序列表中序列5的第1位核苷酸，所述第184位核苷酸對應序列表中序列5的第13位核苷酸。