[發(fā)明專利]Mg離子對(duì)UNC-51激酶活性的影響機(jī)制的發(fā)現(xiàn)

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110407756.4
• 申請(qǐng)日: 2011-12-09
• 公開（公告）號(hào): CN103160567A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田懷澤;李素云;田華希
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 彩虹天健康科技研究(北京)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12Q1/48
• 分類號(hào): C12Q1/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于生物化學(xué)等領(lǐng)域，初次顯示鎂離子(Mg²⁺)強(qiáng)烈地促進(jìn)了UNC-51激酶活性。?

背景技術(shù)：

鎂離子作為最豐富的細(xì)胞內(nèi)二價(jià)陽離子，調(diào)節(jié)許多酶的活性，對(duì)細(xì)胞及生命活動(dòng)是非常重要的。已經(jīng)知道鎂離子對(duì)細(xì)胞骨架有重要影響，但其分子機(jī)理還不清楚。本研究首次證明了鎂離子(Mg²⁺)對(duì)UNC-51激酶活性的影響。為鎂離子對(duì)細(xì)胞的構(gòu)造和功能的作用提出了最基本的分子理論根據(jù)。?

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是弄清楚鎂離子是否影響UNC-51激酶的活性。本發(fā)明的內(nèi)容為：?

(1)鎂離子能增強(qiáng)UNC-51激酶的磷酸化活性?

如圖1所示，在30mM?Hepes(pH7.4)磷酸化反應(yīng)液中，添加適宜濃度的鎂離子，把UNC-51激酶的自我磷酸化活性增加了約4倍。?

(2)鎂離子增強(qiáng)UNC-51激酶活性，也就增強(qiáng)對(duì)微管或微絲的脫聚合作用?

如圖2所示，鎂離子增強(qiáng)UNC-51激酶活性，也就增強(qiáng)對(duì)微管蛋白或肌動(dòng)蛋白等底物的磷酸化，也就增強(qiáng)對(duì)細(xì)胞骨架(微管或微絲)的脫聚合作用；若阻害鎂離子這種作用，就增強(qiáng)了細(xì)胞骨架(微管或微絲)的聚合作用。由此影響細(xì)胞及生命活動(dòng)的機(jī)能。?

附圖說明：

圖1鎂離子能增強(qiáng)UNC-51激酶的磷酸化活性?

圖2鎂離子增強(qiáng)UNC-51激酶活性影響細(xì)胞及生命活動(dòng)的模式?

具體實(shí)施方式：

【1】激酶活性的測(cè)定?

在含有50μM末端放射性表記的腺苷三磷酸[γ-³²P]-ATP的Hepes激酶緩沖反應(yīng)液(pH7.4)中，加入或者不加入鎂離子進(jìn)行UNC-51蛋白激酶的自我磷酸化反應(yīng)。用6.5％的SDS-PAGE和X-線膠片放射自顯影法分析測(cè)定了激酶活性。?