[發明專利]一株銅綠假單胞菌及其應用

無效

• 申請號: 201110407722.5
• 申請日: 2011-12-09
• 公開（公告）號: CN102533589A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 徐正順;牛彥良;王鳳蘭;伍曉林;侯兆偉;郭盟華;金銳
• 申請（專利權）人: 大慶油田有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;B01F17/00;C12R1/385
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

技術領域

本發明屬于微生物技術和環境生物技術領域，具體地說，它涉及一株銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)DQ8?CCTCC?M?208114及其在石油污染物降解中的應用。

背景技術

隨著全球對能源需求的急劇增加，海上油輪泄露事故頻頻發生，油井與煉油廠等也同時排放了大量的含油廢水，這些都造成了巨大的環境污染。對原油污染的不重視，便會危害環境，長期影響人類生存環境。如何處理這些原油污染己經成為許多國家所面臨的重大課題。

據國家權威部門推算，我國每年有60多萬噸石油進入環境，對土壤和海洋造成了嚴重的污染。以大慶油田為例，其開采場所周圍土壤中石油總烴已超過土壤背景值60倍以上。我國大慶、遼河等油田污染區土壤表層(0-20cm)的含油量高達30-50％。對我國北方油田石油污染狀況的調研表明，大慶油田和華北油田采油井周邊土壤石油污染嚴重，含油量在4.8×10⁴-7.7×10⁴mg·kg^-1。大慶油田石油開發區污染土壤面積超過75％，農業開發區污染面積超過20％。我國每年排入大海的石油達11.5萬噸，并且呈增長趨勢。目前，我國近海海域石油平均濃度已達0.055mg/L。石油是各種烷烴、環烷烴和芳香族化合物所組成的混合物，其中還含有雜環化合物；其中的多環芳香族化合物(PAHs)和一些雜環類物質(如咔唑類、噻吩類、呋喃類等)具有持久性和致癌性，是公認的環境毒物。

目前，主要依靠機械刮油和化學吸附等物理、化學方法進行石油類污染的治理。但是物理、化學方法成本高、投資大，并且存在二次污染，因此，這不是解決石油污染的最優方法。而原油中的碳氫化合物能被自然界中的微生物降解，因此，生物修復是比較理想的治理原油污染的方法。但是一旦出現了原油泄露，被污染地區要在短時間內恢復正常需依賴于原油的快速降解微生物，這樣的微生物不僅需要具有降解原油的能力，同時還要具備分泌生物表面活性劑以促進原油在水中的分散度才能使微生物攝取難溶性底物。可見，生物表面活性劑的存在是原油被降解的關鍵步驟。而原油污染地區的本土原油降解菌種類少，對原油的降解能力都比較弱，且很少分泌生物表面活性劑，因此，需要加入對原油降解效果較佳的外源微生物。

國際上對常見的幾種有毒化合物進行了大量的研究，并且分離得到了許多可以降解多環芳烴類化合物的菌株(表1)，但是多數菌株降解底物譜相對較少，在實際應用中受到很大的限制，所以開發具有廣泛底物譜的菌株具有重要的創新性和應用價值。

表1部分報道的多環芳烴降解菌株

石油烴降解菌(hydr?ocarbon?degradat?ionbacter?ia，HDB)能將石油烴作為唯一碳源進行生物降解，并產生氣體、脂肪酸及生物表面活性劑等代謝產物。對石油污染環境的生物修復有重要作用，在微生物采油研究領域的應用日趨廣泛。它能清除石油中的部分石蠟組分，代謝產物主要是有機酸、糖脂類、脂肽類表面活性劑，可進一步改善原油的流動性，降低油水之間的界面張力，有利于提高石油采收率。因此對新型微生物菌種的篩選及性能評價有重要的實用價值，開發具有多功能的石油烴降解菌已成為微生物采油研究的一項重要核心技術。

發明內容

本發明針對石油化合物造成的嚴重污染，提供了一株可降解石油污染物如多環芳烴等的銅綠假單胞菌。

本發明所提供的銅綠假單胞菌菌株(Pseudomonas?aeruginosa)DQ8已于2008年08月04日保藏于中國典型培養物保藏中心(地址：中國?武漢，武漢大學)，保藏編號為CCTCC?M?208114。

銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)CCTCC?M?208114菌落特征及細胞形態：該菌株在LB平板上生長2天形成直徑約2～3mm的菌落，菌落圓形，凸起，表面濕潤，邊緣整齊，半透明。單細胞，呈短桿狀，革蘭氏陰性。

銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)CCTCC?M?208114生理生化特征：呼吸代謝，產熒光、膿青素，不產生H₂S、吲哚、甲基紅；具有硝酸鹽還原性和反硝化能力，不能水解淀粉，具有液化明膠能力，精氨酸雙水解酶和接觸酶陽性，不產芽胞，能利用葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、D-果糖、乳糖、D-半乳糖、甘露醇、L-阿拉伯糖、丙三醇、L-脯氨酸、β-苯丙氨酸、DL-精氨酸，不能利用海藻糖、肌醇。