[發(fā)明專利]2-仲丁基-5-羥基-4，8-二甲基-7，8-二氫-2H-吡喃[4，3，2-ij]異色原烯-3(9αH)-酮及其制備方法和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110401691.2
• 申請日: 2011-12-07
• 公開（公告）號: CN103145723A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設計）人: 羅敏玉;楊志鈞;夏興;王天嬌;陳代杰
• 申請（專利權(quán)）人: 上海來益生物藥物研究開發(fā)中心有限責任公司
• 主分類號: C07D493/06
• 分類號: C07D493/06;C12P17/18;A61K31/352;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 上海華工專利事務所 31104
• 代理人: 應云平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及新化合物，具體地說，是關(guān)于一種新的化合物及其制備方法和應用。?

背景技術(shù)

本申請的發(fā)明人通過自然篩選的方法獲得了一株擬莖點霉屬(Phomopsis?sp.)菌株，命名為HCCB03519，該菌株的保藏號為CGMCC?No.5416。目前對于該菌株的代謝產(chǎn)物的研究很少。?

發(fā)明內(nèi)容

本申請的發(fā)明人在對擬莖點霉屬(Phomopsis?sp.)菌株CGMCC?No.5416的代謝產(chǎn)物的研究過程中，分離得到了一種化合物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定為一種新的化合物。?

因此，本發(fā)明的首要目的在于提供一種新的化合物。?

本發(fā)明的第二個目的在于提供所述化合物的制備方法。?

本發(fā)明的第三個目的在于提供所述化合物的應用。?

本發(fā)明的化合物，化學中文名為2-仲丁基-5-羥基-4，8-二甲基-7，8-二氫-2H-吡喃[4，3，2-ij]異色原烯-3(9αH)-酮，英文名為2-sec-butyl-5-hydroxy-4，8-dimethyl-7，8-dihydro-2H-pyrano[4，3，2-ij]isochromen-3(9aH)-one，其結(jié)構(gòu)式如下：?

本發(fā)明的化合物制備方法是通過發(fā)酵培養(yǎng)擬莖點霉屬(Phomopsis?sp.)菌株CGMCC?No.5416而獲得。?

根據(jù)本發(fā)明，所述制備方法包括對擬莖點霉屬(Phomopsis?sp.)菌株CGMCC?No.5416的代謝產(chǎn)物進行分離純化的步驟。?

根據(jù)一個優(yōu)選實施例，所述發(fā)酵培養(yǎng)的條件如下：?

發(fā)酵溫度為27～30℃，時間為28～35天。?

根據(jù)一個優(yōu)選實施例，所述分離純化包括將發(fā)酵液經(jīng)乙酸乙酯提取的步驟。?

根據(jù)一個優(yōu)選實施例，所述分離純化還包括將乙酸乙酯提取樣品經(jīng)減壓硅膠柱分離的步驟。?

根據(jù)一個優(yōu)選實施例，所述分離純化還包括將減壓硅膠柱分離樣品經(jīng)Sephadex?LH20柱分離的步驟。?

根據(jù)一個優(yōu)選實施例，所述分離純化還包括將Sephadex?LH20柱分離樣品經(jīng)半制備液相色譜純化的步驟。?

本發(fā)明的化合物具有抗腫瘤的效果，可用于制備抗腫瘤藥物。?

根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施例，所述腫瘤包括肺癌、乳腺癌和胰腺癌。?

本發(fā)明不僅提供了一種新的化合物，而且該化合物可用于抗腫瘤，因而具有廣泛的開發(fā)應用前景。?

附圖說明

圖1為本發(fā)明獲得的化合物的質(zhì)譜圖。?

圖2為本發(fā)明獲得的化合物的氫譜圖。?

圖3為本發(fā)明獲得的化合物的碳譜圖。?

具體實施方式

以下通過具體實施例，對本發(fā)明做進一步詳細說明。應理解，以下實施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。?

本發(fā)明所用的菌種為擬莖點霉屬(Phomopsis?sp.)HCCB03519，于2011?年10月28日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏號CGMCCNo.5416。?

以下實施例中所使用的大米培養(yǎng)基的配方為：大米800g，純凈水1000ml，pH自然；115℃滅菌20min。?

實施例1、化合物的制備?

1.1、發(fā)酵?

采用大米培養(yǎng)基固體發(fā)酵擬莖點霉屬(Phomopsis?sp.)菌株HCCB03519，發(fā)酵溫度為27～30℃，時間為28～35天。?

1.2、分離純化?

將1.1獲得的大米發(fā)酵物用乙酸乙酯提取后用減壓硅膠進行柱分離，采用石油醚/乙酸乙酯混合溶劑進行洗脫，其中，石油醚與乙酸乙酯的體積比為75∶25，濃縮得粗樣。?

然后，用Sephadex?LH20柱(3.4×52cm)進行分離，采用二氯甲烷/甲醇混合溶劑進行洗脫，其中，二氯甲烷與甲醇的體積比為20∶1，得到粗樣。?

對得到的粗樣進一步用半制備液相色譜(半制備柱為Agilent?ZORBAX?SB-C18，5μm，9.4mm×250mm)分離(0～25min用58％乙腈等度洗脫，25～40min用58％～100％乙腈梯度洗脫，流速2ml/min)，截取保留時間為25.6min的物質(zhì)，最終獲得化合物純品，用于以下結(jié)構(gòu)鑒定。?

實施例2、化合物的結(jié)構(gòu)鑒定?